医学检验与临床
醫學檢驗與臨床
의학검험여림상
MEDICAL LATORATORY SCIENCE AND CLINICES
2009年
1期
3-5
,共3页
核糖核酸%噬菌体%核糖核酸酶%原核表达%质控品
覈糖覈痠%噬菌體%覈糖覈痠酶%原覈錶達%質控品
핵당핵산%서균체%핵당핵산매%원핵표체%질공품
目的 为耐核糖核酸酶(RNase)的RNA标准品和质控品的表达制备提供一个通用载体平台.方法 将 MS2 噬菌体基因组中包括的成熟酶蛋白和包膜蛋白的基因编码序列的1.7kb cDNA目的 片段,用Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ酶切后,与用相同内切酶酶切的表达载体质粒pET28b,在T4 DNA连接酶的存在下连接,构建一新的表达载体pI NCCL,再转化BE21-DE3 E.Coli进行原核表达.结果 成功构建得到了新的表达载体pI NCCL,经原核表达为耐RNase的病毒样颗粒.结论 本研究得到的pI NCCL表达载体及原核表达系统,可作为一个耐RNase的RNA标准品和质控品的构建和制备表达通用载体平台,将促进有关标准品和质控品的研究.
目的 為耐覈糖覈痠酶(RNase)的RNA標準品和質控品的錶達製備提供一箇通用載體平檯.方法 將 MS2 噬菌體基因組中包括的成熟酶蛋白和包膜蛋白的基因編碼序列的1.7kb cDNA目的 片段,用Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ酶切後,與用相同內切酶酶切的錶達載體質粒pET28b,在T4 DNA連接酶的存在下連接,構建一新的錶達載體pI NCCL,再轉化BE21-DE3 E.Coli進行原覈錶達.結果 成功構建得到瞭新的錶達載體pI NCCL,經原覈錶達為耐RNase的病毒樣顆粒.結論 本研究得到的pI NCCL錶達載體及原覈錶達繫統,可作為一箇耐RNase的RNA標準品和質控品的構建和製備錶達通用載體平檯,將促進有關標準品和質控品的研究.
목적 위내핵당핵산매(RNase)적RNA표준품화질공품적표체제비제공일개통용재체평태.방법 장 MS2 서균체기인조중포괄적성숙매단백화포막단백적기인편마서렬적1.7kb cDNA목적 편단,용Hind Ⅲ화EcoR Ⅰ매절후,여용상동내절매매절적표체재체질립pET28b,재T4 DNA련접매적존재하련접,구건일신적표체재체pI NCCL,재전화BE21-DE3 E.Coli진행원핵표체.결과 성공구건득도료신적표체재체pI NCCL,경원핵표체위내RNase적병독양과립.결론 본연구득도적pI NCCL표체재체급원핵표체계통,가작위일개내RNase적RNA표준품화질공품적구건화제비표체통용재체평태,장촉진유관표준품화질공품적연구.
