中国临床医学
中國臨床醫學
중국림상의학
CLINICAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA
2009年
5期
665-668
,共4页
董俊红%王振明%王平%肖琳%黄焕生
董俊紅%王振明%王平%肖琳%黃煥生
동준홍%왕진명%왕평%초림%황환생
RNA干扰%survivin%顺铂%肺腺癌细胞
RNA榦擾%survivin%順鉑%肺腺癌細胞
RNA간우%survivin%순박%폐선암세포
目的:利用核糖核酸干扰(RNA interference, RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响.方法:将靶向survivin的基因片段插入带有绿色荧光蛋白基因的载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR分析转染前后survivin mRNA的表达情况,免疫荧光及Western blot分析转染前后survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化.结果:成功构建pGenesil1.1-survivin重组质粒.与对照组相比,转染重组质粒后,survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为65%和71%;细胞凋亡率增加;转染前顺铂对A549细胞的IC50为转染后的7.68倍,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:靶向survivin的RNA干扰表达载体能下调survivin基因表达,增强A549细胞对顺铂药物敏感性.
目的:利用覈糖覈痠榦擾(RNA interference, RNAi)技術沉默抗凋亡基因survivin,觀察其對人肺腺癌細胞A549增殖以及順鉑藥物敏感性的影響.方法:將靶嚮survivin的基因片段插入帶有綠色熒光蛋白基因的載體後構建重組質粒,將其導入A549細胞,RT-PCR分析轉染前後survivin mRNA的錶達情況,免疫熒光及Western blot分析轉染前後survivin蛋白的錶達情況,TUNEL法檢測細胞凋亡情況,MTT法檢測轉染後A549細胞對順鉑的敏感性變化.結果:成功構建pGenesil1.1-survivin重組質粒.與對照組相比,轉染重組質粒後,survivin mRNA和蛋白的錶達明顯降低,抑製率分彆為65%和71%;細胞凋亡率增加;轉染前順鉑對A549細胞的IC50為轉染後的7.68倍,兩者比較,差異有統計學意義(P<0.05).結論:靶嚮survivin的RNA榦擾錶達載體能下調survivin基因錶達,增彊A549細胞對順鉑藥物敏感性.
목적:이용핵당핵산간우(RNA interference, RNAi)기술침묵항조망기인survivin,관찰기대인폐선암세포A549증식이급순박약물민감성적영향.방법:장파향survivin적기인편단삽입대유록색형광단백기인적재체후구건중조질립,장기도입A549세포,RT-PCR분석전염전후survivin mRNA적표체정황,면역형광급Western blot분석전염전후survivin단백적표체정황,TUNEL법검측세포조망정황,MTT법검측전염후A549세포대순박적민감성변화.결과:성공구건pGenesil1.1-survivin중조질립.여대조조상비,전염중조질립후,survivin mRNA화단백적표체명현강저,억제솔분별위65%화71%;세포조망솔증가;전염전순박대A549세포적IC50위전염후적7.68배,량자비교,차이유통계학의의(P<0.05).결론:파향survivin적RNA간우표체재체능하조survivin기인표체,증강A549세포대순박약물민감성.
