CAJ | 학술논문

目的探讨间断高浓度葡萄糖对培养的胰岛β细胞(HIT-T15细胞)的损伤机制.方法实验分为对照组(葡萄糖 5.5 mmol/L)、持续高浓度葡萄糖组 (葡萄糖16.7 mmol/L) 、间断高浓度葡萄糖组(葡萄糖1 6.7 mmol/L培养2 h后更换为5.5 mmol/L的葡萄糖3 h,每天重复共3次,夜间9 h维持在5.5 mm ol/L的培养基中)、抗氧化剂(NAC 1.0 mmol/L)+持续高糖组和NAC+间断高糖组.放免法测定胰岛素分泌水平;罗丹明123染色线粒体,激光共聚焦显微镜测量线粒体膜电位(MMP) ;荧光素酶方法检测细胞内ATP含量;硫代巴比妥酸法测量脂质过氧化物丙二醛(MDA) 水平 ;流式细胞仪测定活性氧簇(ROS)的水平.结果高糖刺激后胰岛素分泌量在间断高糖组[(3.13±1.11) μIU/mL]和持续高糖组[(5.18±0.95) μIU/mL]分别较对照组[(9.33±0.62) μIU/mL]均明显减少(P＜0.05);MDA水平、 ROS水平明显升高(P均＜0.05),并且间断高糖组较持续高糖组产生更多的ROS(P＜0.05); 间断高糖组和持续高糖组细胞内ATP含量、MMP水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论间断高浓度葡萄糖与持续高糖均使培养的β细胞线粒体氧化应激水平增高,且间断高糖组较持续高糖组产生更严重的氧化应激,从而使β细胞分泌胰岛素功能受损,其机制可能是由于氧化应激使线粒体的膜电位下降,细胞ATP含量减少所致.
목적 탐토간단고농도포도당대배양적이도β세포(HIT-T15세포)적손상궤제.방법 실험분위대조조(포도당 5.5 mmol/L)、지속고농도포도당조 (포도당16.7 mmol/L) 、간단고농도포도당조(포도당1 6.7 mmol/L배양2 h후경환위5.5 mmol/L적포도당3 h,매천중복공3차,야간9 h유지재5.5 mm ol/L적배양기중)、항양화제(NAC 1.0 mmol/L)+지속고당조화NAC+간단고당조.방면법측정이도소분비수평;라단명123염색선립체,격광공취초현미경측량선립체막전위(MMP) ;형광소매방법검측세포내ATP함량;류대파비타산법측량지질과양화물병이철(MDA) 수평 ;류식세포의측정활성양족(ROS)적수평.결과 고당자격후이도소분비량재간단고당조[(3.13±1.11) μIU/mL]화지속고당조[(5.18±0.95) μIU/mL]분별교대조조[(9.33±0.62) μIU/mL]균명현감소(P＜0.05);MDA수평、 ROS수평명 현승고(P균＜0.05),병차간단고당조교지속고당조산생경다적ROS(P＜0.05); 간단고당조화지속고당조세포내ATP함량、MMP수평명현강저(P＜0.05혹P＜0.01).결론 간단고농도포도당여지속고당균사배양적β세포선립체양화응격수평증고,차간단고당조교지속고당조산생경엄중적양화응격,종이사β세포분비이도소공능 수손,기궤제가능시유우양화응격사선립체적막전위하강,세포ATP함량감소소치.