细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
1期
41-44
,共4页
李婷%郭晓欢%王彧%Markus Plate%邵陆宁%宋泉声%马大龙%韩文玲
李婷%郭曉歡%王彧%Markus Plate%邵陸寧%宋泉聲%馬大龍%韓文玲
리정%곽효환%왕욱%Markus Plate%소륙저%송천성%마대룡%한문령
CMTM4%多肽抗体%免疫亲和纯化
CMTM4%多肽抗體%免疫親和純化
CMTM4%다태항체%면역친화순화
目的:制备抗CMTM4的多肽抗体并鉴定其性能.方法:通过TMHMM、DNAStar等软件对CMTM4的3种剪接体,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列进行分析,选取了4段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联.其中第1、2、3条多肽为3种剪接体共有,混合后免疫家兔,制备Ab1;而第4条多肽为CMTM4-v1所特有,单独免疫家兔,制备Ab2.ELISA法检测抗体效价.免疫亲和层析法纯化后,进行Western blot和免疫组织化学检测,鉴定这2种抗体的特异性与适用范围.结果:得到兔抗人CMTM4多肽抗体Ab1和Ab2,效价分别达1:105和1:106.纯化后的Ab1用于Western blot可特异识别超表达的CMTM4-v1和v2,并可用于免疫组织化学实验;而Ab2仅可用于Western blot,特异性识别超表达的CMTM4-v1.Ab1还可特异识别小鼠内源性Cmtm4.结论:用多肽免疫家兔制备的2种抗CMTM4抗体不仅具有较高的效价以及特异性,并且Ab1还可以特异识别小鼠Cmtm4,为CMTM4的功能研究提供了有力的支持.
目的:製備抗CMTM4的多肽抗體併鑒定其性能.方法:通過TMHMM、DNAStar等軟件對CMTM4的3種剪接體,CMTM4-v1,v2和v3的蛋白序列進行分析,選取瞭4段序列閤成多肽併與鑰孔慼血藍素(KLH)偶聯.其中第1、2、3條多肽為3種剪接體共有,混閤後免疫傢兔,製備Ab1;而第4條多肽為CMTM4-v1所特有,單獨免疫傢兔,製備Ab2.ELISA法檢測抗體效價.免疫親和層析法純化後,進行Western blot和免疫組織化學檢測,鑒定這2種抗體的特異性與適用範圍.結果:得到兔抗人CMTM4多肽抗體Ab1和Ab2,效價分彆達1:105和1:106.純化後的Ab1用于Western blot可特異識彆超錶達的CMTM4-v1和v2,併可用于免疫組織化學實驗;而Ab2僅可用于Western blot,特異性識彆超錶達的CMTM4-v1.Ab1還可特異識彆小鼠內源性Cmtm4.結論:用多肽免疫傢兔製備的2種抗CMTM4抗體不僅具有較高的效價以及特異性,併且Ab1還可以特異識彆小鼠Cmtm4,為CMTM4的功能研究提供瞭有力的支持.
목적:제비항CMTM4적다태항체병감정기성능.방법:통과TMHMM、DNAStar등연건대CMTM4적3충전접체,CMTM4-v1,v2화v3적단백서렬진행분석,선취료4단서렬합성다태병여약공척혈람소(KLH)우련.기중제1、2、3조다태위3충전접체공유,혼합후면역가토,제비Ab1;이제4조다태위CMTM4-v1소특유,단독면역가토,제비Ab2.ELISA법검측항체효개.면역친화층석법순화후,진행Western blot화면역조직화학검측,감정저2충항체적특이성여괄용범위.결과:득도토항인CMTM4다태항체Ab1화Ab2,효개분별체1:105화1:106.순화후적Ab1용우Western blot가특이식별초표체적CMTM4-v1화v2,병가용우면역조직화학실험;이Ab2부가용우Western blot,특이성식별초표체적CMTM4-v1.Ab1환가특이식별소서내원성Cmtm4.결론:용다태면역가토제비적2충항CMTM4항체불부구유교고적효개이급특이성,병차Ab1환가이특이식별소서Cmtm4,위CMTM4적공능연구제공료유력적지지.
