CAJ | 학술논문

目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)诱导的白血病多药耐药细胞株耐药机制以及米非司酮(RU486)逆转其耐药效应.方法:采用反复短期暴露并逐渐增加HHT浓度的方法建立白血病多药耐药细胞系K562/HHT,MTT法检测K562/HHT细胞对化疗药物的敏感性及RU486对该细胞的细胞毒效应,RT-PCR法检测细胞MDR1基因、葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因的表达,流式细胞术检测细胞P-糖蛋白的表达和柔红霉素积累量,免疫组化法检测细胞Bcl-2、Bax、caspase-3的表达状况.结果:成功诱导出多药耐药细胞系K562/HHT,K562/HHT较其亲代细胞K562对HHT、阿霉素、长春新碱、依托泊苷的耐药性分别提高462.6、2.8、1 183.4、2.6倍,K562/HHT细胞MDR1基因、GCS基因、P-糖蛋白和Bcl-2/Bax比值明显高于K562细胞(P＜0.05),caspase-3表达、柔红霉素积累量明显低于K562细胞(P＜0.05).10 μmol/L的RU486对K562/HHT细胞无明显杀伤(存活率94.67%±2.48%),该浓度RU486可不同程度地逆转K562/HHT细胞对上述化疗药物的耐药性,RU486作用后K562/HHT细胞caspase-3表达、柔红霉素积累量明显高于作用前(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值明显低于作用前(P＜0.05).结论:白血病细胞系K562在HHT的作用下可形成多药耐药细胞系K562/HHT,其耐药性的形成与P-糖蛋白、GCS、Bcl-2/Bax比值及caspase-3等机制有关,RU486可通过提高细胞内药物积累、调节Bcl-2/Bax比值和caspase-3的表达逆转此细胞的耐药性.
목적:연구고삼첨삼지감(HHT)유도적백혈병다약내약세포주내약궤제이급미비사동(RU486)역전기내약효응.방법:채용반복단기폭로병축점증가HHT농도적방법건립백혈병다약내약세포계K562/HHT,MTT법검측K562/HHT세포대화료약물적민감성급RU486대해세포적세포독효응,RT-PCR법검측세포MDR1기인、포도당신경선알합성매(GCS)기인적표체,류식세포술검측세포P-당단백적표체화유홍매소적루량,면역조화법검측세포Bcl-2、Bax、caspase-3적표체상황.결과:성공유도출다약내약세포계K562/HHT,K562/HHT교기친대세포K562대HHT、아매소、장춘신감、의탁박감적내약성분별제고462.6、2.8、1 183.4、2.6배,K562/HHT세포MDR1기인、GCS기인、P-당단백화Bcl-2/Bax비치명현고우K562세포(P＜0.05),caspase-3표체、유홍매소적루량명현저우K562세포(P＜0.05).10 μmol/L적RU486대K562/HHT세포무명현살상(존활솔94.67%±2.48%),해농도RU486가불동정도지역전K562/HHT세포대상술화료약물적내약성,RU486작용후K562/HHT세포caspase-3표체、유홍매소적루량명현고우작용전(P＜0.05),Bcl-2/Bax비치명현저우작용전(P＜0.05).결론:백혈병세포계K562재HHT적작용하가형성다약내약세포계K562/HHT,기내약성적형성여P-당단백、GCS、Bcl-2/Bax비치급caspase-3등궤제유관,RU486가통과제고세포내약물적루、조절Bcl-2/Bax비치화caspase-3적표체역전차세포적내약성.