CAJ | 학술논문

目的:研究马兜铃酸(AA)损伤的肾小管上皮细胞中急性肾损伤标志物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Ngal)、肾损伤因子(Kim-1)的表达、分泌特点,并对其在AA肾毒性损伤中的意义进行探讨. 方法:采用20 μg/ml AA作用于体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK2细胞),通过RT-PCR和免疫荧光法分别检测Ngal、Kim-1基因和蛋白的表达,ELISA法检测培养上清中Ngal、Kim-1的分泌,底物显色法监测培养上清中N-乙酰-β-葡萄糖苷酶(NAG)的释放,流式细胞术观察细胞周期改变和凋亡情况. 结果:AA处理HK2细胞6～12 h内,Ngal基因呈一过性表达增加,而Kim-1基因在处理24～48h内持续高水平表达.培养上清中Ngal、Kim-1和NAG的分泌呈不同变化规律:给药12h出现Ngal的一过性分泌高峰;Kim-1的分泌高峰出现在24h并持续48h;NAG的分泌在12 h后开始增加,并持续增加至48 h.诱导Ngal、Kim-1表达和诱导细胞凋亡的AA有效剂量不同.诱导Ngal和Kim-1显著分泌的AA剂量仅引起少量细胞凋亡;而引起大量细胞凋亡的AA剂量不能诱导Ngal和Kim-1分泌. 结论:AA诱导的肾小管上皮细胞损伤伴有Ngal和Kim-1的异常表达和分泌.Ngal是AA损伤早期一过性表达和分泌的分子,而Kim-1和NAG则在损伤过程中呈持续分泌,因此对于临床监测AA所致肾小管损伤具有重要意义.Ngal和Kim-1在AA所致肾小管上皮细胞损伤中的异常表达,为进一步阐明AA肾毒性机制以及临床上早期发现马兜铃酸肾病提供了新的指标.
목적:연구마두령산(AA)손상적신소관상피세포중급성신손상표지물중성립세포명효매상관지질운재단백(Ngal)、신손상인자(Kim-1)적표체、분비특점,병대기재AA신독성손상중적의의진행탐토. 방법:채용20 μg/ml AA작용우체외배양인근단신소관상피세포(HK2세포),통과RT-PCR화면역형광법분별검측Ngal、Kim-1기인화단백적표체,ELISA법검측배양상청중Ngal、Kim-1적분비,저물현색법감측배양상청중N-을선-β-포도당감매(NAG)적석방,류식세포술관찰세포주기개변화조망정황. 결과:AA처리HK2세포6～12 h내,Ngal기인정일과성표체증가,이Kim-1기인재처리24～48h내지속고수평표체.배양상청중Ngal、Kim-1화NAG적분비정불동변화규률:급약12h출현Ngal적일과성분비고봉;Kim-1적분비고봉출현재24h병지속48h;NAG적분비재12 h후개시증가,병지속증가지48 h.유도Ngal、Kim-1표체화유도세포조망적AA유효제량불동.유도Ngal화Kim-1현저분비적AA제량부인기소량세포조망;이인기대량세포조망적AA제량불능유도Ngal화Kim-1분비. 결론:AA유도적신소관상피세포손상반유Ngal화Kim-1적이상표체화분비.Ngal시AA손상조기일과성표체화분비적분자,이Kim-1화NAG칙재손상과정중정지속분비,인차대우림상감측AA소치신소관손상구유중요의의.Ngal화Kim-1재AA소치신소관상피세포손상중적이상표체,위진일보천명AA신독성궤제이급림상상조기발현마두령산신병제공료신적지표.