生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2007年
3期
273-278
,共6页
唐小军%王艳萍%周清华%车国卫%陈小禾
唐小軍%王豔萍%週清華%車國衛%陳小禾
당소군%왕염평%주청화%차국위%진소화
肺癌%自杀基因%端粒酶催化亚单位%靶向性表达
肺癌%自殺基因%耑粒酶催化亞單位%靶嚮性錶達
폐암%자살기인%단립매최화아단위%파향성표체
将自杀基因TK插入质粒pGL3-hTp和pGL3-Control中,取代其上的荧光素酶基因,分别构建hTERT启动子SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK,酶切和PCR鉴定结果显示重组质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK构建成功;用脂质体法将pCL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK瞬时转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞株A549及端粒酶阴性的人胚肺成纤維细胞株MRC-5,RT-PCR显示转染pGL3-SV40-TK的细胞A549和MRC-5均有了TK mRNA表达,转染pGL3-hTp-TK的A549细胞中也有TK mRNA表达,但转染pGL3-hTp-TK的MRC5细胞无TK mRNA表达.提示hTERT启动子可以调控自杀基因HSV-TK在肺癌细胞中靶向表达,可能是肿瘤靶向性基因治疗中比较理想的转录调控元件.
將自殺基因TK插入質粒pGL3-hTp和pGL3-Control中,取代其上的熒光素酶基因,分彆構建hTERT啟動子SV40啟動子調控的TK基因錶達質粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK,酶切和PCR鑒定結果顯示重組質粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK構建成功;用脂質體法將pCL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK瞬時轉染耑粒酶暘性的人肺腺癌細胞株A549及耑粒酶陰性的人胚肺成纖維細胞株MRC-5,RT-PCR顯示轉染pGL3-SV40-TK的細胞A549和MRC-5均有瞭TK mRNA錶達,轉染pGL3-hTp-TK的A549細胞中也有TK mRNA錶達,但轉染pGL3-hTp-TK的MRC5細胞無TK mRNA錶達.提示hTERT啟動子可以調控自殺基因HSV-TK在肺癌細胞中靶嚮錶達,可能是腫瘤靶嚮性基因治療中比較理想的轉錄調控元件.
장자살기인TK삽입질립pGL3-hTp화pGL3-Control중,취대기상적형광소매기인,분별구건hTERT계동자SV40계동자조공적TK기인표체질립pGL3-hTp-TK화pGL3-SV40-TK,매절화PCR감정결과현시중조질립pGL3-hTp-TK화pGL3-SV40-TK구건성공;용지질체법장pCL3-hTp-TK화pGL3-SV40-TK순시전염단립매양성적인폐선암세포주A549급단립매음성적인배폐성섬유세포주MRC-5,RT-PCR현시전염pGL3-SV40-TK적세포A549화MRC-5균유료TK mRNA표체,전염pGL3-hTp-TK적A549세포중야유TK mRNA표체,단전염pGL3-hTp-TK적MRC5세포무TK mRNA표체.제시hTERT계동자가이조공자살기인HSV-TK재폐암세포중파향표체,가능시종류파향성기인치료중비교이상적전록조공원건.
