华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2007年
5期
36-39
,共4页
刘海云%王敏%王继亮%程芳艳%杜维俊
劉海雲%王敏%王繼亮%程芳豔%杜維俊
류해운%왕민%왕계량%정방염%두유준
大豆%SSR%反应体系
大豆%SSR%反應體繫
대두%SSR%반응체계
以大豆为材料,研究了PCR反应体系的主要成分模板DNA浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq酶浓度及退火温度对大豆SSR扩增结果的影响,探索影响SSR扩增结果的各因素的最佳用量及引物的退火温度.结果表明:在试验设计范围内,DNA浓度和dNTP浓度对扩增影响较大,引物浓度在0.05～0.2 μmol/L范围内对扩增影响较小,Taq酶浓度对扩增有一定影响,引物要有其扩增适宜的退火温度.确立了适合大豆SSR分子标记研究的优化体系.最终确定总反应体系为20 μL,模板DNA 20 ng,dNTP 200/μmol/L,引物0.15μmol/L,Taq酶0.5 U,10×Taq Buffer 1.5 mmol/L,ddH2O补至20μL.
以大豆為材料,研究瞭PCR反應體繫的主要成分模闆DNA濃度、dNTP濃度、引物濃度、Taq酶濃度及退火溫度對大豆SSR擴增結果的影響,探索影響SSR擴增結果的各因素的最佳用量及引物的退火溫度.結果錶明:在試驗設計範圍內,DNA濃度和dNTP濃度對擴增影響較大,引物濃度在0.05～0.2 μmol/L範圍內對擴增影響較小,Taq酶濃度對擴增有一定影響,引物要有其擴增適宜的退火溫度.確立瞭適閤大豆SSR分子標記研究的優化體繫.最終確定總反應體繫為20 μL,模闆DNA 20 ng,dNTP 200/μmol/L,引物0.15μmol/L,Taq酶0.5 U,10×Taq Buffer 1.5 mmol/L,ddH2O補至20μL.
이대두위재료,연구료PCR반응체계적주요성분모판DNA농도、dNTP농도、인물농도、Taq매농도급퇴화온도대대두SSR확증결과적영향,탐색영향SSR확증결과적각인소적최가용량급인물적퇴화온도.결과표명:재시험설계범위내,DNA농도화dNTP농도대확증영향교대,인물농도재0.05～0.2 μmol/L범위내대확증영향교소,Taq매농도대확증유일정영향,인물요유기확증괄의적퇴화온도.학립료괄합대두SSR분자표기연구적우화체계.최종학정총반응체계위20 μL,모판DNA 20 ng,dNTP 200/μmol/L,인물0.15μmol/L,Taq매0.5 U,10×Taq Buffer 1.5 mmol/L,ddH2O보지20μL.
