中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2007年
4期
32-35
,共4页
孙敏%魏强%梁成珠%佟巍%丛喆%蒋虹%涂新明
孫敏%魏彊%樑成珠%佟巍%叢喆%蔣虹%塗新明
손민%위강%량성주%동외%총철%장홍%도신명
SIV p27抗原%单克隆抗体%双抗体夹心ELISA
SIV p27抗原%單剋隆抗體%雙抗體夾心ELISA
SIV p27항원%단극륭항체%쌍항체협심ELISA
目的建立检测SIV p27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用.方法使用Protein A亲和层析柱纯化腹水中的SIV p27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记.经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度后,探索构建检测SIV p27抗原的双抗体夹心ELISA法.应用建立的双抗体夹心ELISA法,对SIV模型猴血浆标本和SHIV模型猴病毒分离培养上清标本进行了检测,并将其结果与Coulter公司试剂盒检测结果进行比较.结果以稀释至20 ug/mL的2E12为包被抗体、1∶400稀释的酶标3G3为检测抗体为ELISA最优体系.模型猴血浆标本和病毒分离培养上清标本的检测结果表明自建体系可以用于SIV p27抗原的检测,特异性良好,灵敏度略低于Coulter公司试剂盒.结论检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法初步建成,为研制有独立知识产权的检测试剂奠定了一定的基础.
目的建立檢測SIV p27抗原的雙抗體夾心ELISA方法併進行初步應用.方法使用Protein A親和層析柱純化腹水中的SIV p27單抗,用過碘痠鈉法對單抗進行辣根過氧化物酶標記.經抗體配對實驗確定包被抗體和檢測抗體,再用棋盤滴定法確定抗體工作濃度後,探索構建檢測SIV p27抗原的雙抗體夾心ELISA法.應用建立的雙抗體夾心ELISA法,對SIV模型猴血漿標本和SHIV模型猴病毒分離培養上清標本進行瞭檢測,併將其結果與Coulter公司試劑盒檢測結果進行比較.結果以稀釋至20 ug/mL的2E12為包被抗體、1∶400稀釋的酶標3G3為檢測抗體為ELISA最優體繫.模型猴血漿標本和病毒分離培養上清標本的檢測結果錶明自建體繫可以用于SIV p27抗原的檢測,特異性良好,靈敏度略低于Coulter公司試劑盒.結論檢測SIVp27抗原的雙抗體夾心ELISA方法初步建成,為研製有獨立知識產權的檢測試劑奠定瞭一定的基礎.
목적건립검측SIV p27항원적쌍항체협심ELISA방법병진행초보응용.방법사용Protein A친화층석주순화복수중적SIV p27단항,용과전산납법대단항진행랄근과양화물매표기.경항체배대실험학정포피항체화검측항체,재용기반적정법학정항체공작농도후,탐색구건검측SIV p27항원적쌍항체협심ELISA법.응용건립적쌍항체협심ELISA법,대SIV모형후혈장표본화SHIV모형후병독분리배양상청표본진행료검측,병장기결과여Coulter공사시제합검측결과진행비교.결과이희석지20 ug/mL적2E12위포피항체、1∶400희석적매표3G3위검측항체위ELISA최우체계.모형후혈장표본화병독분리배양상청표본적검측결과표명자건체계가이용우SIV p27항원적검측,특이성량호,령민도략저우Coulter공사시제합.결론검측SIVp27항원적쌍항체협심ELISA방법초보건성,위연제유독립지식산권적검측시제전정료일정적기출.
