CAJ | 학술논문

目的运用依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)技术检测氯化消毒饮用水浓集物对ras基因的DNA损伤作用,探讨其可能致癌作用分子机制.方法采用酚-氯仿-异戊醇法提取人的类淋巴母细胞(TK6)的DNA,采用PCR法制备人类N-ras基因外显子1、2和H-ras基因外显子1、2(以下分别简称为N1、N2、H1、H2)单链探针.将采集的某自来水厂水源水和管网末梢水各150 L进行浓集,分别以0.1、0.5、1L/ml的剂量(相当于原水)对TK6细胞进行染毒,提取基因组DNA,再经RDPCR扩增,扩增产物与N1、N2、H1、H2单链探针杂交、显色.结果管网末梢水水样浓集物染毒组DNA经N2特异性引物指导下的RDPCR扩增产物,与N2单链探针杂交,在1L/ml浓度组观察到1条杂交显色条带,在0.1、0.5L/ml浓度组均未观察到杂交条带;经H1、H2、N1特异性引物指导下的RDPCR扩增产物与相应的基因特异性单链探针杂交,在0.1、0.5、1L/ml浓度组均未观察到杂交条带.水源水水样浓集物染毒组DNA经N1、N2、H1、H2特异性引物指导下的RDPCR扩增产物与相应的基因特异性单链探针杂交,在0.1、0.5、1L/ml浓度组均未观察到杂交条带.结论氯化消毒饮用水浓集物对N2具有DNA损伤作用,具有遗传毒性.
목적 운용의뢰수궤화말단련접물PCR(RDPCR)기술검측록화소독음용수농집물대ras기인적DNA손상작용,탐토기가능치암작용분자궤제.방법 채용분-록방-이무순법제취인적류림파모세포(TK6)적DNA,채용PCR법제비인류N-ras기인외현자1、2화H-ras기인외현자1、2(이하분별간칭위N1、N2、H1、H2)단련탐침.장채집적모자래수엄수원수화관망말소수각150 L진행농집,분별이0.1、0.5、1L/ml적제량(상당우원수)대TK6세포진행염독,제취기인조DNA,재경RDPCR확증,확증산물여N1、N2、H1、H2단련탐침잡교、현색.결과 관망말소수수양농집물염독조DNA경N2특이성인물지도하적RDPCR확증산물,여N2단련탐침잡교,재1L/ml농도조관찰도1조잡교현색조대,재0.1、0.5L/ml농도조균미관찰도잡교조대;경H1、H2、N1특이성인물지도하적RDPCR확증산물여상응적기인특이성단련탐침잡교,재0.1、0.5、1L/ml농도조균미관찰도잡교조대.수원수수양농집물염독조DNA경N1、N2、H1、H2특이성인물지도하적RDPCR확증산물여상응적기인특이성단련탐침잡교,재0.1、0.5、1L/ml농도조균미관찰도잡교조대.결론 록화소독음용수농집물대N2구유DNA손상작용,구유유전독성.