微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2005年
4期
580-583
,共4页
吴建祥%刘成科%洪健%刘文洪%叶美琴
吳建祥%劉成科%洪健%劉文洪%葉美琴
오건상%류성과%홍건%류문홍%협미금
百合无症病毒%单克隆抗体%ACP-ELISA
百閤無癥病毒%單剋隆抗體%ACP-ELISA
백합무증병독%단극륭항체%ACP-ELISA
用百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得4株能稳定传代并分泌抗LSV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞(2A2、5H9、5H2和5E12),并分别制备它们的单抗腹水.4株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,5H9和5E12的抗体类型及亚类均为IgG1,而2A2和5H2均为IgG3,4株单克隆抗体的轻链均为κ链.利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)检测LSV的方法.病叶作1:300倍稀释、提纯LSV病毒浓度为18ng/mL(每孔的病毒绝对量为1.8ng)时,该方法仍能检测到病毒.利用ACP-ELISA检测了田间样品,发现LSV在百合上发病很普遍.
用百閤無癥病毒(Lily symptomless virus,LSV)免疫的BALB/C鼠脾細胞與SP2/0鼠骨髓瘤細胞融閤,經篩選剋隆,穫得4株能穩定傳代併分泌抗LSV單剋隆抗體(MAb)的雜交瘤細胞(2A2、5H9、5H2和5E12),併分彆製備它們的單抗腹水.4株單剋隆抗體腹水間接ELISA效價達10-6,5H9和5E12的抗體類型及亞類均為IgG1,而2A2和5H2均為IgG3,4株單剋隆抗體的輕鏈均為κ鏈.利用單剋隆抗體建立瞭抗原包被間接ELISA(ACP-ELISA)檢測LSV的方法.病葉作1:300倍稀釋、提純LSV病毒濃度為18ng/mL(每孔的病毒絕對量為1.8ng)時,該方法仍能檢測到病毒.利用ACP-ELISA檢測瞭田間樣品,髮現LSV在百閤上髮病很普遍.
용백합무증병독(Lily symptomless virus,LSV)면역적BALB/C서비세포여SP2/0서골수류세포융합,경사선극륭,획득4주능은정전대병분비항LSV단극륭항체(MAb)적잡교류세포(2A2、5H9、5H2화5E12),병분별제비타문적단항복수.4주단극륭항체복수간접ELISA효개체10-6,5H9화5E12적항체류형급아류균위IgG1,이2A2화5H2균위IgG3,4주단극륭항체적경련균위κ련.이용단극륭항체건립료항원포피간접ELISA(ACP-ELISA)검측LSV적방법.병협작1:300배희석、제순LSV병독농도위18ng/mL(매공적병독절대량위1.8ng)시,해방법잉능검측도병독.이용ACP-ELISA검측료전간양품,발현LSV재백합상발병흔보편.
