CAJ | 학술논문

目的:探讨Kinectin的抗原性,为下一步研究Kinectin在白塞氏病中的意义奠定基础.方法:从人Hep2细胞抽提RNA,利用RT-PCR扩增能覆盖Kinectin全长的3个片段,其位置分别相当于氨基酸22～510(kin-5),503～994(kin-M)和920～1 346(kin-3).将扩增的PCR片段克隆到pET42-a(+)载体中,诱导表达的融合蛋白用白塞氏病病人血清进行Western blot分析.结果:构建的3个表达Kinectin部分片段载体(pET/kin-5、pET/kin-M和pET/Kin-3)具有正确的阅读框架,DNA测序符合率为99%,能在大肠杆菌中表达相应的肽段.8份阳性血清中,用Western blot分析发现,6份血清与kin-M反应,5份血清与kin-3反应,只有一份血清与kin-5有反应.结论:成功地构建表达覆盖Kinectin全长的3个载体,并初步发现Kinectin的抗原性可能主要位于其中间段和羧基端.
목적:탐토Kinectin적항원성,위하일보연구Kinectin재백새씨병중적의의전정기출.방법:종인Hep2세포추제RNA,이용RT-PCR확증능복개Kinectin전장적3개편단,기위치분별상당우안기산22～510(kin-5),503～994(kin-M)화920～1 346(kin-3).장확증적PCR편단극륭도pET42-a(+)재체중,유도표체적융합단백용백새씨병병인혈청진행Western blot분석.결과:구건적3개표체Kinectin부분편단재체(pET/kin-5、pET/kin-M화pET/Kin-3)구유정학적열독광가,DNA측서부합솔위99%,능재대장간균중표체상응적태단.8빈양성혈청중,용Western blot분석발현,6빈혈청여kin-M반응,5빈혈청여kin-3반응,지유일빈혈청여kin-5유반응.결론:성공지구건표체복개Kinectin전장적3개재체,병초보발현Kinectin적항원성가능주요위우기중간단화최기단.