沈阳农业大学学报
瀋暘農業大學學報
침양농업대학학보
JOURNAL OF SHENYANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2001年
3期
216-217
,共2页
彭德良%S A Subbotin%Maurice Moens%唐文华
彭德良%S A Subbotin%Maurice Moens%唐文華
팽덕량%S A Subbotin%Maurice Moens%당문화
大豆胞囊线虫%DNA检测技术%特异性引物
大豆胞囊線蟲%DNA檢測技術%特異性引物
대두포낭선충%DNA검측기술%특이성인물
描述了一种基于双倍PCR技术,用种特异性引物快速鉴定大豆胞囊线虫方法.应用两组引物扩增胞囊线虫的rDNA.第一组引物含有2个通用引物D3A和D3B,用于扩增大亚基核糖体基因(28S rDNAgene)的D3扩展区;第二组引物包括大豆胞囊线虫种特异性引物GlyF1和一个通用引物rDNA2,用于扩增ITS2区的片断和部分28S基因.用此双倍PCR扩增技术检测了来自中国、俄罗斯、美国和巴西的53个大豆胞囊线虫群体,结果表明, 用两组引物进行双倍PCR扩增, 所有53个大豆胞囊线虫群体都产生两个明显的片断(181 bp and 345 bp),其中181bp片断是SCN特异性引物GlyF1和rDNA2扩增出大豆胞囊线虫中特异性片断.在所测试的其它胞囊线虫群体,仅仅扩增出345bp的片断,而不能扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断.用该项技术能从大豆胞囊线虫的单个胞囊或单头二龄幼虫的微量DNA中,扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断,该技术的敏感性达到单条二龄幼虫的水平.
描述瞭一種基于雙倍PCR技術,用種特異性引物快速鑒定大豆胞囊線蟲方法.應用兩組引物擴增胞囊線蟲的rDNA.第一組引物含有2箇通用引物D3A和D3B,用于擴增大亞基覈糖體基因(28S rDNAgene)的D3擴展區;第二組引物包括大豆胞囊線蟲種特異性引物GlyF1和一箇通用引物rDNA2,用于擴增ITS2區的片斷和部分28S基因.用此雙倍PCR擴增技術檢測瞭來自中國、俄囉斯、美國和巴西的53箇大豆胞囊線蟲群體,結果錶明, 用兩組引物進行雙倍PCR擴增, 所有53箇大豆胞囊線蟲群體都產生兩箇明顯的片斷(181 bp and 345 bp),其中181bp片斷是SCN特異性引物GlyF1和rDNA2擴增齣大豆胞囊線蟲中特異性片斷.在所測試的其它胞囊線蟲群體,僅僅擴增齣345bp的片斷,而不能擴增齣大豆胞囊線蟲的特異性片斷.用該項技術能從大豆胞囊線蟲的單箇胞囊或單頭二齡幼蟲的微量DNA中,擴增齣大豆胞囊線蟲的特異性片斷,該技術的敏感性達到單條二齡幼蟲的水平.
묘술료일충기우쌍배PCR기술,용충특이성인물쾌속감정대두포낭선충방법.응용량조인물확증포낭선충적rDNA.제일조인물함유2개통용인물D3A화D3B,용우확증대아기핵당체기인(28S rDNAgene)적D3확전구;제이조인물포괄대두포낭선충충특이성인물GlyF1화일개통용인물rDNA2,용우확증ITS2구적편단화부분28S기인.용차쌍배PCR확증기술검측료래자중국、아라사、미국화파서적53개대두포낭선충군체,결과표명, 용량조인물진행쌍배PCR확증, 소유53개대두포낭선충군체도산생량개명현적편단(181 bp and 345 bp),기중181bp편단시SCN특이성인물GlyF1화rDNA2확증출대두포낭선충중특이성편단.재소측시적기타포낭선충군체,부부확증출345bp적편단,이불능확증출대두포낭선충적특이성편단.용해항기술능종대두포낭선충적단개포낭혹단두이령유충적미량DNA중,확증출대두포낭선충적특이성편단,해기술적민감성체도단조이령유충적수평.
