华东理工大学学报（自然科学版）
華東理工大學學報（自然科學版）
화동리공대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE)
2000年
3期
279-283
,共5页
储炬%蔡海波%胡千德%郭元昕%叶勤%徐伦
儲炬%蔡海波%鬍韆德%郭元昕%葉勤%徐倫
저거%채해파%호천덕%곽원흔%협근%서륜
酿酒酵母%重组酵母菌%培养%α2a型干扰素%腺嘌呤
釀酒酵母%重組酵母菌%培養%α2a型榦擾素%腺嘌呤
양주효모%중조효모균%배양%α2a형간우소%선표령
研究了摇瓶培养条件对人α2a干扰素酵母工程菌生长及表达的影响,结果表明,当基础料中腺嘌呤含量为20μg/mL,在发酵进行至12h时再加入20μg/mL腺嘌呤时,IFN-α2a生物活性及比活分别达到了7.3×106IU/mL及6.77×107IU/mg.发酵过程中后期补入适量葡萄糖,且维持低糖水平,有利表达.维持总碳源含量不变,使培养基中葡萄糖与蔗糖比例为1∶0.1,结果IFN-α2a生物活性及比活分别比对照增加了一倍以上.在发酵进行至12h时,加入2g/L谷氨酸,IFN-α2a生物活性及比活分别比对照提高了1.76倍及1.94倍,而添加0.25～1.0g/L赖氨酸也能显著提高表达水平.培养基初始pH对产物表达有较大影响,初始pH为6.5时,对表达最有利.利用上述摇瓶培养优化条件,在2.6L生物反应器中进行补料分批培养,人α2a干扰素生物活性达到了1.3×107IU/mL,为原工艺的3倍.
研究瞭搖瓶培養條件對人α2a榦擾素酵母工程菌生長及錶達的影響,結果錶明,噹基礎料中腺嘌呤含量為20μg/mL,在髮酵進行至12h時再加入20μg/mL腺嘌呤時,IFN-α2a生物活性及比活分彆達到瞭7.3×106IU/mL及6.77×107IU/mg.髮酵過程中後期補入適量葡萄糖,且維持低糖水平,有利錶達.維持總碳源含量不變,使培養基中葡萄糖與蔗糖比例為1∶0.1,結果IFN-α2a生物活性及比活分彆比對照增加瞭一倍以上.在髮酵進行至12h時,加入2g/L穀氨痠,IFN-α2a生物活性及比活分彆比對照提高瞭1.76倍及1.94倍,而添加0.25～1.0g/L賴氨痠也能顯著提高錶達水平.培養基初始pH對產物錶達有較大影響,初始pH為6.5時,對錶達最有利.利用上述搖瓶培養優化條件,在2.6L生物反應器中進行補料分批培養,人α2a榦擾素生物活性達到瞭1.3×107IU/mL,為原工藝的3倍.
연구료요병배양조건대인α2a간우소효모공정균생장급표체적영향,결과표명,당기출료중선표령함량위20μg/mL,재발효진행지12h시재가입20μg/mL선표령시,IFN-α2a생물활성급비활분별체도료7.3×106IU/mL급6.77×107IU/mg.발효과정중후기보입괄량포도당,차유지저당수평,유리표체.유지총탄원함량불변,사배양기중포도당여자당비례위1∶0.1,결과IFN-α2a생물활성급비활분별비대조증가료일배이상.재발효진행지12h시,가입2g/L곡안산,IFN-α2a생물활성급비활분별비대조제고료1.76배급1.94배,이첨가0.25～1.0g/L뢰안산야능현저제고표체수평.배양기초시pH대산물표체유교대영향,초시pH위6.5시,대표체최유리.이용상술요병배양우화조건,재2.6L생물반응기중진행보료분비배양,인α2a간우소생물활성체도료1.3×107IU/mL,위원공예적3배.
