微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2000年
5期
523-527
,共5页
钞亚鹏%赵永芳%刘斌斌%王银善
鈔亞鵬%趙永芳%劉斌斌%王銀善
초아붕%조영방%류빈빈%왕은선
甲基营养酶%甲胺磷降解酶%纯化
甲基營養酶%甲胺燐降解酶%純化
갑기영양매%갑알린강해매%순화
甲基营养菌WB1菌株在以甲胺磷作碳氮源的无机盐培养基上生长时,产生甲胺磷降解酶情况较好,培养20 h为细胞收获的适宜时期。所得细胞经过超声波破碎、吐温-20抽提、热处理(60℃,9min)、DEAE-纤维素32和CM-纤维素32柱层析等步骤,得到的酶制品比活力为18.0U/mg,收率78.8%,纯化倍数22.8。纯化的酶制品经连续聚丙烯酰胺凝胶电泳,呈现一条主带,酶活力染色则呈现一条与之对应的活性谱带;该酶催化反应的适宜pH为9.0,底物专一性不强,Hg2+、Mn2+、Cu2+对酶有强烈的抑制作用。部分纯化酶制品在-20℃(0.1md/L的磷酸盐溶液中)存放5d,酶活力丧失约60%。
甲基營養菌WB1菌株在以甲胺燐作碳氮源的無機鹽培養基上生長時,產生甲胺燐降解酶情況較好,培養20 h為細胞收穫的適宜時期。所得細胞經過超聲波破碎、吐溫-20抽提、熱處理(60℃,9min)、DEAE-纖維素32和CM-纖維素32柱層析等步驟,得到的酶製品比活力為18.0U/mg,收率78.8%,純化倍數22.8。純化的酶製品經連續聚丙烯酰胺凝膠電泳,呈現一條主帶,酶活力染色則呈現一條與之對應的活性譜帶;該酶催化反應的適宜pH為9.0,底物專一性不彊,Hg2+、Mn2+、Cu2+對酶有彊烈的抑製作用。部分純化酶製品在-20℃(0.1md/L的燐痠鹽溶液中)存放5d,酶活力喪失約60%。
갑기영양균WB1균주재이갑알린작탄담원적무궤염배양기상생장시,산생갑알린강해매정황교호,배양20 h위세포수획적괄의시기。소득세포경과초성파파쇄、토온-20추제、열처리(60℃,9min)、DEAE-섬유소32화CM-섬유소32주층석등보취,득도적매제품비활력위18.0U/mg,수솔78.8%,순화배수22.8。순화적매제품경련속취병희선알응효전영,정현일조주대,매활력염색칙정현일조여지대응적활성보대;해매최화반응적괄의pH위9.0,저물전일성불강,Hg2+、Mn2+、Cu2+대매유강렬적억제작용。부분순화매제품재-20℃(0.1md/L적린산염용액중)존방5d,매활력상실약60%。