湖南医科大学学报
湖南醫科大學學報
호남의과대학학보
BULLETIN OF HUNAN MEDICAL UNIVERSITY
2002年
6期
553-555
,共3页
赵迪诚%龙志高%郑多%戴和平%夏昆
趙迪誠%龍誌高%鄭多%戴和平%夏昆
조적성%룡지고%정다%대화평%하곤
单克隆分离%血纤维蛋白膜层%直接消化挑取法
單剋隆分離%血纖維蛋白膜層%直接消化挑取法
단극륭분리%혈섬유단백막층%직접소화도취법
目的:建立一种高效的贴壁细胞单克隆分离法.方法:将细胞悬液稀释成4个密度梯度后接种于分隔开的血纤维蛋白膜层的皿上生长,克隆形成后吸0.25%的胰酶消化,用移液器头直接挑取.结果:永生细胞系和正常二倍体细胞在10 *cm-2,5 *cm-2两种接种密度时可分离到较多的单克隆,分离的单克隆永生细胞培养1个月左右,细胞总数可达106个;但分离的正常二倍体细胞需培养1个半月左右,细胞总数才达106个 .结论:细胞接种于被分隔成不同区域的血纤维蛋白膜层的皿上,采用直接消化法可有效获得单细胞克隆,接种密度以10 *cm-2,5 *cm-2两种为最佳.
目的:建立一種高效的貼壁細胞單剋隆分離法.方法:將細胞懸液稀釋成4箇密度梯度後接種于分隔開的血纖維蛋白膜層的皿上生長,剋隆形成後吸0.25%的胰酶消化,用移液器頭直接挑取.結果:永生細胞繫和正常二倍體細胞在10 *cm-2,5 *cm-2兩種接種密度時可分離到較多的單剋隆,分離的單剋隆永生細胞培養1箇月左右,細胞總數可達106箇;但分離的正常二倍體細胞需培養1箇半月左右,細胞總數纔達106箇 .結論:細胞接種于被分隔成不同區域的血纖維蛋白膜層的皿上,採用直接消化法可有效穫得單細胞剋隆,接種密度以10 *cm-2,5 *cm-2兩種為最佳.
목적:건립일충고효적첩벽세포단극륭분리법.방법:장세포현액희석성4개밀도제도후접충우분격개적혈섬유단백막층적명상생장,극륭형성후흡0.25%적이매소화,용이액기두직접도취.결과:영생세포계화정상이배체세포재10 *cm-2,5 *cm-2량충접충밀도시가분리도교다적단극륭,분리적단극륭영생세포배양1개월좌우,세포총수가체106개;단분리적정상이배체세포수배양1개반월좌우,세포총수재체106개 .결론:세포접충우피분격성불동구역적혈섬유단백막층적명상,채용직접소화법가유효획득단세포극륭,접충밀도이10 *cm-2,5 *cm-2량충위최가.
