第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
9期
769-771
,共3页
陈蕾%黄威权%孙绪德%吕宝真%蒲若蕾
陳蕾%黃威權%孫緒德%呂寶真%蒲若蕾
진뢰%황위권%손서덕%려보진%포약뢰
胃壁细胞%细胞分离%细胞培养
胃壁細胞%細胞分離%細胞培養
위벽세포%세포분리%세포배양
目的完成胃壁细胞分离及纯化,建立原代培养胃壁细胞的方法. 方法制备大鼠翻转的胃囊用含链霉蛋白酶E的消化液注入胃囊内孵育,并用磁力搅拌器轻轻搅拌而制备单个的胃底腺细胞,Percoll梯度离心富集胃壁细胞,用含100 mL*L-1血清的PBS培养液,时差贴壁去除成纤维细胞,然后,将壁细胞接种于培养板中,培养液用无血清的1∶1 Harm's F-12/DMEM培养,内含胰岛素5 mg*L-1,氢化可地松4 μg*L-1,转铁蛋白5 mg*L-1,硒酸钠5 μg*L-1,牛血清白蛋白2 g*L-1,表皮生长因子25 μg*L-1,葡萄糖1.98 g*L-1持续培养可达1 wk以上. 结果获得的壁细胞经吖啶橙(acridine orange,AO)鉴定纯度达80%以上,原代培养经HE染色可见壁细胞呈分散小组式生长,且生长状态良好. 结论此方法适宜于大鼠胃壁细胞的分离及体外培养,为体外进一步研究壁细胞的功能打下基础.
目的完成胃壁細胞分離及純化,建立原代培養胃壁細胞的方法. 方法製備大鼠翻轉的胃囊用含鏈黴蛋白酶E的消化液註入胃囊內孵育,併用磁力攪拌器輕輕攪拌而製備單箇的胃底腺細胞,Percoll梯度離心富集胃壁細胞,用含100 mL*L-1血清的PBS培養液,時差貼壁去除成纖維細胞,然後,將壁細胞接種于培養闆中,培養液用無血清的1∶1 Harm's F-12/DMEM培養,內含胰島素5 mg*L-1,氫化可地鬆4 μg*L-1,轉鐵蛋白5 mg*L-1,硒痠鈉5 μg*L-1,牛血清白蛋白2 g*L-1,錶皮生長因子25 μg*L-1,葡萄糖1.98 g*L-1持續培養可達1 wk以上. 結果穫得的壁細胞經吖啶橙(acridine orange,AO)鑒定純度達80%以上,原代培養經HE染色可見壁細胞呈分散小組式生長,且生長狀態良好. 結論此方法適宜于大鼠胃壁細胞的分離及體外培養,為體外進一步研究壁細胞的功能打下基礎.
목적완성위벽세포분리급순화,건립원대배양위벽세포적방법. 방법제비대서번전적위낭용함련매단백매E적소화액주입위낭내부육,병용자력교반기경경교반이제비단개적위저선세포,Percoll제도리심부집위벽세포,용함100 mL*L-1혈청적PBS배양액,시차첩벽거제성섬유세포,연후,장벽세포접충우배양판중,배양액용무혈청적1∶1 Harm's F-12/DMEM배양,내함이도소5 mg*L-1,경화가지송4 μg*L-1,전철단백5 mg*L-1,서산납5 μg*L-1,우혈청백단백2 g*L-1,표피생장인자25 μg*L-1,포도당1.98 g*L-1지속배양가체1 wk이상. 결과획득적벽세포경아정등(acridine orange,AO)감정순도체80%이상,원대배양경HE염색가견벽세포정분산소조식생장,차생장상태량호. 결론차방법괄의우대서위벽세포적분리급체외배양,위체외진일보연구벽세포적공능타하기출.
