第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
9期
985-987
,共3页
温新宇%舒翠玲%黎燕%戚中田%沈倍奋
溫新宇%舒翠玲%黎燕%慼中田%瀋倍奮
온신우%서취령%려연%척중전%침배강
CD38%克隆,分子%基因表达%真核细胞
CD38%剋隆,分子%基因錶達%真覈細胞
CD38%극륭,분자%기인표체%진핵세포
目的:克隆并表达人CD38抗原分子的全长cDNA.方法:采用RT-PCR法,从高表达CD38抗原的Daudi细胞系中克隆出CD38全长cDNA并将其插入pGEM-T载体中,重新设计引物,引入酶切位点,二次PCR;从重组pGEMT载体上扩增CD38抗原分子的cDNA编码序列,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),用脂质体法转染COS7细胞.用免疫荧光及APAAP方法检测CD38抗原的表达.结果:克隆的CD38抗原的全长cDNA,经酶切鉴定及序列分析表明,其序列与文献报道完全一致.免疫荧光及APAAP方法检测表明,CD38抗原分子在COS7细胞中获得表达.结论:成功构建了CD38真核表达载体,并在COS7细胞中获得表达,对研究CD38分子的功能具有重要的意义.
目的:剋隆併錶達人CD38抗原分子的全長cDNA.方法:採用RT-PCR法,從高錶達CD38抗原的Daudi細胞繫中剋隆齣CD38全長cDNA併將其插入pGEM-T載體中,重新設計引物,引入酶切位點,二次PCR;從重組pGEMT載體上擴增CD38抗原分子的cDNA編碼序列,再亞剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1(+),用脂質體法轉染COS7細胞.用免疫熒光及APAAP方法檢測CD38抗原的錶達.結果:剋隆的CD38抗原的全長cDNA,經酶切鑒定及序列分析錶明,其序列與文獻報道完全一緻.免疫熒光及APAAP方法檢測錶明,CD38抗原分子在COS7細胞中穫得錶達.結論:成功構建瞭CD38真覈錶達載體,併在COS7細胞中穫得錶達,對研究CD38分子的功能具有重要的意義.
목적:극륭병표체인CD38항원분자적전장cDNA.방법:채용RT-PCR법,종고표체CD38항원적Daudi세포계중극륭출CD38전장cDNA병장기삽입pGEM-T재체중,중신설계인물,인입매절위점,이차PCR;종중조pGEMT재체상확증CD38항원분자적cDNA편마서렬,재아극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(+),용지질체법전염COS7세포.용면역형광급APAAP방법검측CD38항원적표체.결과:극륭적CD38항원적전장cDNA,경매절감정급서렬분석표명,기서렬여문헌보도완전일치.면역형광급APAAP방법검측표명,CD38항원분자재COS7세포중획득표체.결론:성공구건료CD38진핵표체재체,병재COS7세포중획득표체,대연구CD38분자적공능구유중요적의의.
