细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2002年
3期
211-213
,共3页
黄丰%万永玲%吴达龙%吴德政%袁志宏%李克勤
黃豐%萬永玲%吳達龍%吳德政%袁誌宏%李剋勤
황봉%만영령%오체룡%오덕정%원지굉%리극근
人IL-18结合蛋白A%基因表达%CHO细胞
人IL-18結閤蛋白A%基因錶達%CHO細胞
인IL-18결합단백A%기인표체%CHO세포
目的克隆人IL-18结合蛋白A(hIL-18BPa)的cDNA,构建真核表达载体及其在CHO细胞中的表达.方法采用RT-PCR,自人白血病血细胞株Jurkat中获得hIL-18BPa的cDNA.将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1中.以脂质体介导法,将其转染CHO细胞,用G418筛选抗性克隆,ELISA法测定其生物学活性.结果获得的IL-18BPa的cDNA序列与GeneBank登录的cDNA序列一致.将hIL-18BPa插入载体pcDNA3.1后,成功地构建稳定表达的载体.转染CHO细胞后,获得可稳定表达hIL-18BPa的基因工程细胞株.经纯化后,证明具有良好的生物学活性.结论成功地克隆hIL-18BPa基因,并实现了在CHO细胞中的稳定表达,为研究其生物学活性奠定了基础.
目的剋隆人IL-18結閤蛋白A(hIL-18BPa)的cDNA,構建真覈錶達載體及其在CHO細胞中的錶達.方法採用RT-PCR,自人白血病血細胞株Jurkat中穫得hIL-18BPa的cDNA.將其剋隆至T-vector中,經測序確證後,將該基因定嚮插入真覈錶達載體pcDNA3.1中.以脂質體介導法,將其轉染CHO細胞,用G418篩選抗性剋隆,ELISA法測定其生物學活性.結果穫得的IL-18BPa的cDNA序列與GeneBank登錄的cDNA序列一緻.將hIL-18BPa插入載體pcDNA3.1後,成功地構建穩定錶達的載體.轉染CHO細胞後,穫得可穩定錶達hIL-18BPa的基因工程細胞株.經純化後,證明具有良好的生物學活性.結論成功地剋隆hIL-18BPa基因,併實現瞭在CHO細胞中的穩定錶達,為研究其生物學活性奠定瞭基礎.
목적극륭인IL-18결합단백A(hIL-18BPa)적cDNA,구건진핵표체재체급기재CHO세포중적표체.방법채용RT-PCR,자인백혈병혈세포주Jurkat중획득hIL-18BPa적cDNA.장기극륭지T-vector중,경측서학증후,장해기인정향삽입진핵표체재체pcDNA3.1중.이지질체개도법,장기전염CHO세포,용G418사선항성극륭,ELISA법측정기생물학활성.결과획득적IL-18BPa적cDNA서렬여GeneBank등록적cDNA서렬일치.장hIL-18BPa삽입재체pcDNA3.1후,성공지구건은정표체적재체.전염CHO세포후,획득가은정표체hIL-18BPa적기인공정세포주.경순화후,증명구유량호적생물학활성.결론성공지극륭hIL-18BPa기인,병실현료재CHO세포중적은정표체,위연구기생물학활성전정료기출.
