水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2002年
2期
168-174
,共7页
郑敏%答亮%邓明刚%秦艺旻%周明%赵开弘
鄭敏%答亮%鄧明剛%秦藝旻%週明%趙開弘
정민%답량%산명강%진예민%주명%조개홍
藻红蓝蛋白操纵子F基因%基因克隆%基因表达
藻紅藍蛋白操縱子F基因%基因剋隆%基因錶達
조홍람단백조종자F기인%기인극륭%기인표체
以层理鞭枝藻总DNA为模板,用PCR技术扩增得到藻红蓝蛋白操纵子F基因(pecF),然后克隆于质粒pBluescript sk(+).将pecF基因亚克隆于表达载体pGEMD,所形成重组质粒pGEMD-pecF在E.coli BL21(DE3)中获得10%外源表达蛋白并形成包涵体.这个表达产物的分子量为22.5kDa,与按DNA序列预测的蛋白分子量一致.经藻红蓝蛋白α-亚基的重组实验证明,该pecF基因编码的表达产物PecF与藻红蓝蛋白操纵子E基因(pecE)的表达产物PecE共同存在时,具有藻红蓝蛋白裂合酶活性.
以層理鞭枝藻總DNA為模闆,用PCR技術擴增得到藻紅藍蛋白操縱子F基因(pecF),然後剋隆于質粒pBluescript sk(+).將pecF基因亞剋隆于錶達載體pGEMD,所形成重組質粒pGEMD-pecF在E.coli BL21(DE3)中穫得10%外源錶達蛋白併形成包涵體.這箇錶達產物的分子量為22.5kDa,與按DNA序列預測的蛋白分子量一緻.經藻紅藍蛋白α-亞基的重組實驗證明,該pecF基因編碼的錶達產物PecF與藻紅藍蛋白操縱子E基因(pecE)的錶達產物PecE共同存在時,具有藻紅藍蛋白裂閤酶活性.
이층리편지조총DNA위모판,용PCR기술확증득도조홍람단백조종자F기인(pecF),연후극륭우질립pBluescript sk(+).장pecF기인아극륭우표체재체pGEMD,소형성중조질립pGEMD-pecF재E.coli BL21(DE3)중획득10%외원표체단백병형성포함체.저개표체산물적분자량위22.5kDa,여안DNA서렬예측적단백분자량일치.경조홍람단백α-아기적중조실험증명,해pecF기인편마적표체산물PecF여조홍람단백조종자E기인(pecE)적표체산물PecE공동존재시,구유조홍람단백렬합매활성.
