中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2004年
10期
47-51
,共5页
何正祥%张部昌%马清钧%张艳红
何正祥%張部昌%馬清鈞%張豔紅
하정상%장부창%마청균%장염홍
重组人生长激素%周质分泌表达%亲和层析
重組人生長激素%週質分泌錶達%親和層析
중조인생장격소%주질분비표체%친화층석
在5L发酵罐中将工程菌pET-ompA3-hGH/BL21(DE3)进行补料式发酵,诱导表达分泌型重组人生长激素.通过对发酵培养基成分、补料成分、补料体积、补料时机和滴加流速的选择,分泌表达rhGH的量可达到250mg/L,占周质蛋白的44%～54%,发酵周期缩短为8h.用rhGH纯蛋白免疫动物制备的多克隆抗体制成的抗体亲和层析柱,一步纯化大肠杆菌周质中分泌表达的rhGH,产物纯度达到96%以上,纯化产物在分子质量大小、免疫活性和二硫键的形成与天然生长激素相一致.
在5L髮酵罐中將工程菌pET-ompA3-hGH/BL21(DE3)進行補料式髮酵,誘導錶達分泌型重組人生長激素.通過對髮酵培養基成分、補料成分、補料體積、補料時機和滴加流速的選擇,分泌錶達rhGH的量可達到250mg/L,佔週質蛋白的44%～54%,髮酵週期縮短為8h.用rhGH純蛋白免疫動物製備的多剋隆抗體製成的抗體親和層析柱,一步純化大腸桿菌週質中分泌錶達的rhGH,產物純度達到96%以上,純化產物在分子質量大小、免疫活性和二硫鍵的形成與天然生長激素相一緻.
재5L발효관중장공정균pET-ompA3-hGH/BL21(DE3)진행보료식발효,유도표체분비형중조인생장격소.통과대발효배양기성분、보료성분、보료체적、보료시궤화적가류속적선택,분비표체rhGH적량가체도250mg/L,점주질단백적44%～54%,발효주기축단위8h.용rhGH순단백면역동물제비적다극륭항체제성적항체친화층석주,일보순화대장간균주질중분비표체적rhGH,산물순도체도96%이상,순화산물재분자질량대소、면역활성화이류건적형성여천연생장격소상일치.
