中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
10期
173-178
,共6页
张飞%王炜勇%张智%葛亚英%沈福泉%郁永明
張飛%王煒勇%張智%葛亞英%瀋福泉%鬱永明
장비%왕위용%장지%갈아영%침복천%욱영명
光萼荷属%SRAP%正交试验设计%反应体系优化%引物筛选
光萼荷屬%SRAP%正交試驗設計%反應體繫優化%引物篩選
광악하속%SRAP%정교시험설계%반응체계우화%인물사선
为了建立光萼荷属植物(Aechmea) SRAP-PCR反应体系,为今后光萼荷属植物种质资源研究提供技术支持,通过L16(45)正交试验设计,对光萼荷属植物SRAP反应体系中的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA浓度等5个因素进行优化试验,并筛选多态性SRAP引物组合.结果表明,光萼荷属植物的最佳SRAP反应体系为1.50 mmol/L Mg2+、400 μmol/L dNTPs、1.5 UTaq DNA聚合酶、15 μmol/L引物、30 ng模板DNA及1×PCR buffer.各因素对SRAP-PCR扩增反应结果影响的差异较大,依次为模板DNA＞Taq DNA聚合酶＞dNTPs＞引物＞Mg2+.从56对SRAP引物组合中筛选出51对扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物组合,多态性引物比率达90％以上.通过不同光萼荷属植物和不同引物组合对该反应体系进行验证,均获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱,表明本研究建立的光萼荷属植物SRAP-PCR反应体系稳定可靠.
為瞭建立光萼荷屬植物(Aechmea) SRAP-PCR反應體繫,為今後光萼荷屬植物種質資源研究提供技術支持,通過L16(45)正交試驗設計,對光萼荷屬植物SRAP反應體繫中的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚閤酶、引物和模闆DNA濃度等5箇因素進行優化試驗,併篩選多態性SRAP引物組閤.結果錶明,光萼荷屬植物的最佳SRAP反應體繫為1.50 mmol/L Mg2+、400 μmol/L dNTPs、1.5 UTaq DNA聚閤酶、15 μmol/L引物、30 ng模闆DNA及1×PCR buffer.各因素對SRAP-PCR擴增反應結果影響的差異較大,依次為模闆DNA＞Taq DNA聚閤酶＞dNTPs＞引物＞Mg2+.從56對SRAP引物組閤中篩選齣51對擴增條帶清晰、多態性豐富的SRAP引物組閤,多態性引物比率達90％以上.通過不同光萼荷屬植物和不同引物組閤對該反應體繫進行驗證,均穫得瞭多態性豐富、條帶清晰的擴增圖譜,錶明本研究建立的光萼荷屬植物SRAP-PCR反應體繫穩定可靠.
위료건립광악하속식물(Aechmea) SRAP-PCR반응체계,위금후광악하속식물충질자원연구제공기술지지,통과L16(45)정교시험설계,대광악하속식물SRAP반응체계중적Mg2+、dNTPs、Taq DNA취합매、인물화모판DNA농도등5개인소진행우화시험,병사선다태성SRAP인물조합.결과표명,광악하속식물적최가SRAP반응체계위1.50 mmol/L Mg2+、400 μmol/L dNTPs、1.5 UTaq DNA취합매、15 μmol/L인물、30 ng모판DNA급1×PCR buffer.각인소대SRAP-PCR확증반응결과영향적차이교대,의차위모판DNA＞Taq DNA취합매＞dNTPs＞인물＞Mg2+.종56대SRAP인물조합중사선출51대확증조대청석、다태성봉부적SRAP인물조합,다태성인물비솔체90％이상.통과불동광악하속식물화불동인물조합대해반응체계진행험증,균획득료다태성봉부、조대청석적확증도보,표명본연구건립적광악하속식물SRAP-PCR반응체계은정가고.
