种子
種子
충자
SEED
2012年
7期
28-31
,共4页
郭亮%史艳财%熊忠臣%范进顺%韦霄%李晓铁
郭亮%史豔財%熊忠臣%範進順%韋霄%李曉鐵
곽량%사염재%웅충신%범진순%위소%리효철
毛竹%ISSR-PCR%正交试验设计%优化
毛竹%ISSR-PCR%正交試驗設計%優化
모죽%ISSR-PCR%정교시험설계%우화
采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA浓度及退火温度对毛竹ISSR-PCR扩增效果的影响.毛竹ISSR-PCR反应体系为:25μL的体系中含Mg2+1.5mmol/L,Dntp 0.25mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA 30ng,10×Buffer 2.5μL.扩增程序为94℃预变性5min,94℃变性45 s,54℃退火60 s,72℃延伸1.5min,40个循环；72℃延伸7min,4℃保存.该体系稳定、可靠,可用于毛竹遗传多样性分析.
採用正交和單因素試驗設計方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚閤酶、模闆DNA濃度及退火溫度對毛竹ISSR-PCR擴增效果的影響.毛竹ISSR-PCR反應體繫為:25μL的體繫中含Mg2+1.5mmol/L,Dntp 0.25mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚閤酶1.0U,模闆DNA 30ng,10×Buffer 2.5μL.擴增程序為94℃預變性5min,94℃變性45 s,54℃退火60 s,72℃延伸1.5min,40箇循環；72℃延伸7min,4℃保存.該體繫穩定、可靠,可用于毛竹遺傳多樣性分析.
채용정교화단인소시험설계방법,연구Mg2+、dNTP、인물、TaqDNA취합매、모판DNA농도급퇴화온도대모죽ISSR-PCR확증효과적영향.모죽ISSR-PCR반응체계위:25μL적체계중함Mg2+1.5mmol/L,Dntp 0.25mmol/L,인물1.0μmol/L,TaqDNA취합매1.0U,모판DNA 30ng,10×Buffer 2.5μL.확증정서위94℃예변성5min,94℃변성45 s,54℃퇴화60 s,72℃연신1.5min,40개순배；72℃연신7min,4℃보존.해체계은정、가고,가용우모죽유전다양성분석.
