实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2011年
4期
262-264
,共3页
张云%韩继敏%王锁英%潘小晶
張雲%韓繼敏%王鎖英%潘小晶
장운%한계민%왕쇄영%반소정
T-bet基因%呼吸道合胞病毒%基因转染%小鼠
T-bet基因%呼吸道閤胞病毒%基因轉染%小鼠
T-bet기인%호흡도합포병독%기인전염%소서
目的 观察携带T-bet基因的重组腺相关病毒(rAAV-T-bet)转染对呼吸道合胞病毒(RSV)感染模型小鼠呼吸道炎症的影响.方法 健康6～8周龄Balb/c小鼠40只.按随机数字表法分为4组:正常对照组(A组)、RSV感染模型组(B组)、模型/对照病毒rAAV载体介导的增强型绿色荧光蛋白(rAAV-eGFP)干预组(C组)及模型/rAAV-T-bet干预组(D组),每组10只.将B组、C组和D组小鼠用滴度为1.26×1010 PFU·L-1的RSV液滴鼻,每只100 μL;A组用等量人喉癌上皮细胞(Hep-2细胞)培养上清液代替RSV液.于RSV接种第5天,再次麻醉小鼠,A组和B组经鼻滴入293细胞培养上清液;C组经鼻滴入293细胞包装的rAAV-eGFP对照病毒液,D组经鼻滴入293细胞包装的rAAV-T-bet.7 d后处死小鼠,检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞成分及IL-4和γ干扰素(IFN-γ)水平,并观察其肺组织病理学变化.结果 1.B组小鼠BALF中细胞总数和淋巴细胞计数百分比分别为(43.91±10.41)×109L-1、(65.15±1.88)%,A组分别为(14.52±3.57)×109L-1、(25.79±1.07)%,A组与B组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05);D 组小鼠BALF中细胞总数和淋巴细胞计数百分比分别为(24.84±4.35)×109L-1、(29.48±11.97)%,与B组、C组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05).2.B组小鼠BALF中IL-4和IFN-γ水平分别为(74.32±10.06) ng·L-1、(89.36±20.38) ng·L-1,A组分别为(6.01±1.02) ng·L-1、(177.32±18.16) ng·L-1,A组与B组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05);D组分别为(49.14±7.59) ng·L-1、(145.28±43.52) ng·L-1,与B组、C组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05).3.A组小鼠呼吸道无明显炎症改变;B组和C组小鼠小支气管、血管黏膜下和周围肺组织有明显炎性细胞浸润,血管壁明显水肿;D组小鼠呼吸道炎症明显减轻.结论 T-bet基因转染能改善RSV感染模型小鼠呼吸道内细胞因子IL-4和IFN-γ异常表达,同时对淋巴细胞在肺内聚集、肺组织炎症有一定抑制作用.
目的 觀察攜帶T-bet基因的重組腺相關病毒(rAAV-T-bet)轉染對呼吸道閤胞病毒(RSV)感染模型小鼠呼吸道炎癥的影響.方法 健康6～8週齡Balb/c小鼠40隻.按隨機數字錶法分為4組:正常對照組(A組)、RSV感染模型組(B組)、模型/對照病毒rAAV載體介導的增彊型綠色熒光蛋白(rAAV-eGFP)榦預組(C組)及模型/rAAV-T-bet榦預組(D組),每組10隻.將B組、C組和D組小鼠用滴度為1.26×1010 PFU·L-1的RSV液滴鼻,每隻100 μL;A組用等量人喉癌上皮細胞(Hep-2細胞)培養上清液代替RSV液.于RSV接種第5天,再次痳醉小鼠,A組和B組經鼻滴入293細胞培養上清液;C組經鼻滴入293細胞包裝的rAAV-eGFP對照病毒液,D組經鼻滴入293細胞包裝的rAAV-T-bet.7 d後處死小鼠,檢測各組小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細胞成分及IL-4和γ榦擾素(IFN-γ)水平,併觀察其肺組織病理學變化.結果 1.B組小鼠BALF中細胞總數和淋巴細胞計數百分比分彆為(43.91±10.41)×109L-1、(65.15±1.88)%,A組分彆為(14.52±3.57)×109L-1、(25.79±1.07)%,A組與B組比較差異均有統計學意義(Pa<0.05);D 組小鼠BALF中細胞總數和淋巴細胞計數百分比分彆為(24.84±4.35)×109L-1、(29.48±11.97)%,與B組、C組比較差異均有統計學意義(Pa<0.05).2.B組小鼠BALF中IL-4和IFN-γ水平分彆為(74.32±10.06) ng·L-1、(89.36±20.38) ng·L-1,A組分彆為(6.01±1.02) ng·L-1、(177.32±18.16) ng·L-1,A組與B組比較差異均有統計學意義(Pa<0.05);D組分彆為(49.14±7.59) ng·L-1、(145.28±43.52) ng·L-1,與B組、C組比較差異均有統計學意義(Pa<0.05).3.A組小鼠呼吸道無明顯炎癥改變;B組和C組小鼠小支氣管、血管黏膜下和週圍肺組織有明顯炎性細胞浸潤,血管壁明顯水腫;D組小鼠呼吸道炎癥明顯減輕.結論 T-bet基因轉染能改善RSV感染模型小鼠呼吸道內細胞因子IL-4和IFN-γ異常錶達,同時對淋巴細胞在肺內聚集、肺組織炎癥有一定抑製作用.
목적 관찰휴대T-bet기인적중조선상관병독(rAAV-T-bet)전염대호흡도합포병독(RSV)감염모형소서호흡도염증적영향.방법 건강6～8주령Balb/c소서40지.안수궤수자표법분위4조:정상대조조(A조)、RSV감염모형조(B조)、모형/대조병독rAAV재체개도적증강형록색형광단백(rAAV-eGFP)간예조(C조)급모형/rAAV-T-bet간예조(D조),매조10지.장B조、C조화D조소서용적도위1.26×1010 PFU·L-1적RSV액적비,매지100 μL;A조용등량인후암상피세포(Hep-2세포)배양상청액대체RSV액.우RSV접충제5천,재차마취소서,A조화B조경비적입293세포배양상청액;C조경비적입293세포포장적rAAV-eGFP대조병독액,D조경비적입293세포포장적rAAV-T-bet.7 d후처사소서,검측각조소서지기관폐포관세액(BALF)중세포성분급IL-4화γ간우소(IFN-γ)수평,병관찰기폐조직병이학변화.결과 1.B조소서BALF중세포총수화림파세포계수백분비분별위(43.91±10.41)×109L-1、(65.15±1.88)%,A조분별위(14.52±3.57)×109L-1、(25.79±1.07)%,A조여B조비교차이균유통계학의의(Pa<0.05);D 조소서BALF중세포총수화림파세포계수백분비분별위(24.84±4.35)×109L-1、(29.48±11.97)%,여B조、C조비교차이균유통계학의의(Pa<0.05).2.B조소서BALF중IL-4화IFN-γ수평분별위(74.32±10.06) ng·L-1、(89.36±20.38) ng·L-1,A조분별위(6.01±1.02) ng·L-1、(177.32±18.16) ng·L-1,A조여B조비교차이균유통계학의의(Pa<0.05);D조분별위(49.14±7.59) ng·L-1、(145.28±43.52) ng·L-1,여B조、C조비교차이균유통계학의의(Pa<0.05).3.A조소서호흡도무명현염증개변;B조화C조소서소지기관、혈관점막하화주위폐조직유명현염성세포침윤,혈관벽명현수종;D조소서호흡도염증명현감경.결론 T-bet기인전염능개선RSV감염모형소서호흡도내세포인자IL-4화IFN-γ이상표체,동시대림파세포재폐내취집、폐조직염증유일정억제작용.
