中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2007年
27期
1918-1923
,共6页
徐国萍%李清泉%曹汐汐%陈琦%赵仲华%刁自强%许祖德
徐國萍%李清泉%曹汐汐%陳琦%趙仲華%刁自彊%許祖德
서국평%리청천%조석석%진기%조중화%조자강%허조덕
转化生长因子β%上皮细胞%间质细胞%转染
轉化生長因子β%上皮細胞%間質細胞%轉染
전화생장인자β%상피세포%간질세포%전염
目的 检测转化生长因子(TGF)β1能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变(EMT),以及Smad7基因转染能否阻止此种转变及相关信号转导机制.方法 采用脂质体法转染Smad7基因到大鼠肺泡Ⅱ型上皮(RLE-6TN);实时荧光PCR及免疫印迹法检测转染前后上皮细胞标志物(E-cadherin,CK19)、间质细胞标志物(FN、Vimentin及α-SMA)及Smad信号通路相关蛋白表达变化;相差显微镜观察TGFβ1诱导的肺泡上皮细胞形态改变,其超微结构改变采用透射电镜观察.结果 成功转染Smad7到RLE-6TN;转染前,在TGFβ1作用下,RLE-6TN间质标志物的表达在mRNA和蛋白水平上调,而上皮标志物表达下调;转染后,其间质标志物下调的同时上皮标志物上调;转染前RLE-6TN在TGFβ1作用下p-Smad2/3表达上调,转染后其表达无明显改变;形态学上,TGFβ1能诱导肺泡上皮发生EMT,Smad7转染则能阻止EMT;超微结构上,TGFβ1能诱导肺泡上皮特有板层小体变性、肿胀并随其时间延长最终完全消失.结论 TGFβ1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关,Smad7转染能在一定程度上阻止该转变.
目的 檢測轉化生長因子(TGF)β1能否在體外誘導肺泡Ⅱ型上皮細胞嚮間質細胞轉變(EMT),以及Smad7基因轉染能否阻止此種轉變及相關信號轉導機製.方法 採用脂質體法轉染Smad7基因到大鼠肺泡Ⅱ型上皮(RLE-6TN);實時熒光PCR及免疫印跡法檢測轉染前後上皮細胞標誌物(E-cadherin,CK19)、間質細胞標誌物(FN、Vimentin及α-SMA)及Smad信號通路相關蛋白錶達變化;相差顯微鏡觀察TGFβ1誘導的肺泡上皮細胞形態改變,其超微結構改變採用透射電鏡觀察.結果 成功轉染Smad7到RLE-6TN;轉染前,在TGFβ1作用下,RLE-6TN間質標誌物的錶達在mRNA和蛋白水平上調,而上皮標誌物錶達下調;轉染後,其間質標誌物下調的同時上皮標誌物上調;轉染前RLE-6TN在TGFβ1作用下p-Smad2/3錶達上調,轉染後其錶達無明顯改變;形態學上,TGFβ1能誘導肺泡上皮髮生EMT,Smad7轉染則能阻止EMT;超微結構上,TGFβ1能誘導肺泡上皮特有闆層小體變性、腫脹併隨其時間延長最終完全消失.結論 TGFβ1能在體外誘導肺泡Ⅱ型上皮嚮間質細胞轉變,其機製部分與Smad信號轉導途徑相關,Smad7轉染能在一定程度上阻止該轉變.
목적 검측전화생장인자(TGF)β1능부재체외유도폐포Ⅱ형상피세포향간질세포전변(EMT),이급Smad7기인전염능부조지차충전변급상관신호전도궤제.방법 채용지질체법전염Smad7기인도대서폐포Ⅱ형상피(RLE-6TN);실시형광PCR급면역인적법검측전염전후상피세포표지물(E-cadherin,CK19)、간질세포표지물(FN、Vimentin급α-SMA)급Smad신호통로상관단백표체변화;상차현미경관찰TGFβ1유도적폐포상피세포형태개변,기초미결구개변채용투사전경관찰.결과 성공전염Smad7도RLE-6TN;전염전,재TGFβ1작용하,RLE-6TN간질표지물적표체재mRNA화단백수평상조,이상피표지물표체하조;전염후,기간질표지물하조적동시상피표지물상조;전염전RLE-6TN재TGFβ1작용하p-Smad2/3표체상조,전염후기표체무명현개변;형태학상,TGFβ1능유도폐포상피발생EMT,Smad7전염칙능조지EMT;초미결구상,TGFβ1능유도폐포상피특유판층소체변성、종창병수기시간연장최종완전소실.결론 TGFβ1능재체외유도폐포Ⅱ형상피향간질세포전변,기궤제부분여Smad신호전도도경상관,Smad7전염능재일정정도상조지해전변.
