中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2005年
5期
336-338
,共3页
樊晓光%阎来喜%王惠珍%张悦红%牛勃
樊曉光%閻來喜%王惠珍%張悅紅%牛勃
번효광%염래희%왕혜진%장열홍%우발
树突细胞%T淋巴细胞%克隆,分子%NOD鼠
樹突細胞%T淋巴細胞%剋隆,分子%NOD鼠
수돌세포%T림파세포%극륭,분자%NOD서
目的为了阐明实验性免疫性甲状腺炎的诱发机制,本研究以甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)为抗原,树突状细胞(dendritic cells,DCs)为抗原提呈细胞(antigen-presenting cells,APCs),建立了T细胞克隆.方法NOD鼠饲养于无菌环境中喂养0.05%碘化钠8周后,每2周采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测Tg水平,然后每只小鼠用100 μg Tg的剂量混于完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)中免疫小鼠2次,用增殖实验优化Tg的含量,寻找DCs摄取提呈Tg的最适抗原量,然后将免疫后鼠的脾细胞作为T细胞与同基因鼠的与抗原孵育过的DCs培养.结果建立了3个Tg特异性的T细胞克隆,这些细胞克隆在体外培养时间>2年以上,流式细胞仪检测其表型均为CD4+,而且分泌干扰素(IFN)-γ,不分泌白细胞介素(IL)-4.结论DCs起APCs的作用,在T细胞系及T细胞克隆的建立中起极为重要的作用.否则,T细胞即使在Tg及IL-2存在的培养环境中也仅能存活数天,此实验结论将为研究实验性免疫性甲状腺炎的诱发机制提供理论依据和实验手段.
目的為瞭闡明實驗性免疫性甲狀腺炎的誘髮機製,本研究以甲狀腺毬蛋白(thyroglobulin,Tg)為抗原,樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)為抗原提呈細胞(antigen-presenting cells,APCs),建立瞭T細胞剋隆.方法NOD鼠飼養于無菌環境中餵養0.05%碘化鈉8週後,每2週採血,用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測Tg水平,然後每隻小鼠用100 μg Tg的劑量混于完全弗氏佐劑(complete Freund adjuvant,CFA)中免疫小鼠2次,用增殖實驗優化Tg的含量,尋找DCs攝取提呈Tg的最適抗原量,然後將免疫後鼠的脾細胞作為T細胞與同基因鼠的與抗原孵育過的DCs培養.結果建立瞭3箇Tg特異性的T細胞剋隆,這些細胞剋隆在體外培養時間>2年以上,流式細胞儀檢測其錶型均為CD4+,而且分泌榦擾素(IFN)-γ,不分泌白細胞介素(IL)-4.結論DCs起APCs的作用,在T細胞繫及T細胞剋隆的建立中起極為重要的作用.否則,T細胞即使在Tg及IL-2存在的培養環境中也僅能存活數天,此實驗結論將為研究實驗性免疫性甲狀腺炎的誘髮機製提供理論依據和實驗手段.
목적위료천명실험성면역성갑상선염적유발궤제,본연구이갑상선구단백(thyroglobulin,Tg)위항원,수돌상세포(dendritic cells,DCs)위항원제정세포(antigen-presenting cells,APCs),건립료T세포극륭.방법NOD서사양우무균배경중위양0.05%전화납8주후,매2주채혈,용매련면역흡부시험(ELISA)측Tg수평,연후매지소서용100 μg Tg적제량혼우완전불씨좌제(complete Freund adjuvant,CFA)중면역소서2차,용증식실험우화Tg적함량,심조DCs섭취제정Tg적최괄항원량,연후장면역후서적비세포작위T세포여동기인서적여항원부육과적DCs배양.결과건립료3개Tg특이성적T세포극륭,저사세포극륭재체외배양시간>2년이상,류식세포의검측기표형균위CD4+,이차분비간우소(IFN)-γ,불분비백세포개소(IL)-4.결론DCs기APCs적작용,재T세포계급T세포극륭적건립중기겁위중요적작용.부칙,T세포즉사재Tg급IL-2존재적배양배경중야부능존활수천,차실험결론장위연구실험성면역성갑상선염적유발궤제제공이론의거화실험수단.