中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2007年
1期
22-25
,共4页
吴仁蔚%肖运才%胡思顺%李自力%石德时%许青荣%毕丁仁
吳仁蔚%肖運纔%鬍思順%李自力%石德時%許青榮%畢丁仁
오인위%초운재%호사순%리자력%석덕시%허청영%필정인
H9N2亚型禽流感病毒%单克隆抗体%抗蛋白抗原
H9N2亞型禽流感病毒%單剋隆抗體%抗蛋白抗原
H9N2아형금류감병독%단극륭항체%항단백항원
以纯化的H9N2亚型禽流感病毒为抗原,免疫BALB/c小鼠,细胞融合后,经间接ELISA和血凝抑制试验(HI)筛选,获得了8株能稳定分泌抗禽流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验证明,8株杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水的特异ELISA抗体效价可达1∶3.2×103～1∶5.1×106,其中2株HI效价达212.8株单抗与H5亚型血凝素分型抗原不发生血凝,与减蛋综合征(EDS-76)病毒、传染性支气管炎病毒(IBV)、新城疫病毒(NDV)均不反应.亚类鉴定证实,除1C7单抗为IgG2b外,其他7株均为IgG1亚类.Western blotting试验分析初步表明,8株单抗至少针对纯化病毒粒子3种不同的蛋白抗原,其中3株针对核蛋白(NP),2株针对基质蛋白M1,2株针对血凝素HA/HA1.对感染细胞的Western blotting分析结果与纯化病毒结果基本一致,其中1株未明显沉淀纯化病毒粒子蛋白的单抗可以与感染细胞的M2蛋白多肽反应.
以純化的H9N2亞型禽流感病毒為抗原,免疫BALB/c小鼠,細胞融閤後,經間接ELISA和血凝抑製試驗(HI)篩選,穫得瞭8株能穩定分泌抗禽流感病毒單剋隆抗體的雜交瘤細胞株.特異性試驗證明,8株雜交瘤細胞株誘生小鼠腹水的特異ELISA抗體效價可達1∶3.2×103～1∶5.1×106,其中2株HI效價達212.8株單抗與H5亞型血凝素分型抗原不髮生血凝,與減蛋綜閤徵(EDS-76)病毒、傳染性支氣管炎病毒(IBV)、新城疫病毒(NDV)均不反應.亞類鑒定證實,除1C7單抗為IgG2b外,其他7株均為IgG1亞類.Western blotting試驗分析初步錶明,8株單抗至少針對純化病毒粒子3種不同的蛋白抗原,其中3株針對覈蛋白(NP),2株針對基質蛋白M1,2株針對血凝素HA/HA1.對感染細胞的Western blotting分析結果與純化病毒結果基本一緻,其中1株未明顯沉澱純化病毒粒子蛋白的單抗可以與感染細胞的M2蛋白多肽反應.
이순화적H9N2아형금류감병독위항원,면역BALB/c소서,세포융합후,경간접ELISA화혈응억제시험(HI)사선,획득료8주능은정분비항금류감병독단극륭항체적잡교류세포주.특이성시험증명,8주잡교류세포주유생소서복수적특이ELISA항체효개가체1∶3.2×103～1∶5.1×106,기중2주HI효개체212.8주단항여H5아형혈응소분형항원불발생혈응,여감단종합정(EDS-76)병독、전염성지기관염병독(IBV)、신성역병독(NDV)균불반응.아류감정증실,제1C7단항위IgG2b외,기타7주균위IgG1아류.Western blotting시험분석초보표명,8주단항지소침대순화병독입자3충불동적단백항원,기중3주침대핵단백(NP),2주침대기질단백M1,2주침대혈응소HA/HA1.대감염세포적Western blotting분석결과여순화병독결과기본일치,기중1주미명현침정순화병독입자단백적단항가이여감염세포적M2단백다태반응.
