中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2007年
6期
600-603
,共4页
神经再生条件液%神经营养因子%蛋白提取%兔
神經再生條件液%神經營養因子%蛋白提取%兔
신경재생조건액%신경영양인자%단백제취%토
目的 了解神经再生条件液(never regeneration conditioned fluid,NRCF)中蛋白质成分组成及相对分子质量为220×103的蛋白带中是否存在一类新的尚未知的神经活性因子.方法 新西兰大白兔25只,体重1.8～2.5 kg,取坐骨神经建立神经再生室模型.术后1周采集NRCF,采用凝胶过滤法分离NRCF中蛋白质,主要分离相对分子质量为220×103的蛋白带,应用自然聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)法检测其相对分子质量.并对取得的相对分子质量为220×103(a峰)和(20～40)×103(c峰)的蛋白带,分别应用已知的神经活性因子抗体:抗神经生长因子(nerve growth factor, NGF)抗体、抗胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor, GDNF)抗体、抗脑源神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)抗体、抗神经营养素3(neurotrophin 3,NT-3)抗体、抗NT-4抗体、抗睫状神经营养因子(ciliang neurotrophic factor,CNTF)抗体,采用Western blot免疫印迹法和ELISA检测,观察抗原抗体反应.结果 经凝胶过滤法分离的NRCF蛋白质,多集中在相对分子质量为(20～40)×103和220×103.相对分子质量为(20～40)×103蛋白带中神经营养因子与抗NGF、抗BDNF、抗NT-3、抗CNTF等抗体反应,相对分子质量为220×103的蛋白带所含神经营养因子仅与抗NT-4抗体反应.结论 NRCF中相对分子质量为220×103的蛋白带仅与抗NT-4抗体反应,且生物活性远强于NT-4,该蛋白带中可能存在一类新的神经活性因子.
目的 瞭解神經再生條件液(never regeneration conditioned fluid,NRCF)中蛋白質成分組成及相對分子質量為220×103的蛋白帶中是否存在一類新的尚未知的神經活性因子.方法 新西蘭大白兔25隻,體重1.8～2.5 kg,取坐骨神經建立神經再生室模型.術後1週採集NRCF,採用凝膠過濾法分離NRCF中蛋白質,主要分離相對分子質量為220×103的蛋白帶,應用自然聚丙烯酰胺凝膠電泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)法檢測其相對分子質量.併對取得的相對分子質量為220×103(a峰)和(20～40)×103(c峰)的蛋白帶,分彆應用已知的神經活性因子抗體:抗神經生長因子(nerve growth factor, NGF)抗體、抗膠質細胞源性神經營養因子(glial cell-derived neurotrophic factor, GDNF)抗體、抗腦源神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)抗體、抗神經營養素3(neurotrophin 3,NT-3)抗體、抗NT-4抗體、抗睫狀神經營養因子(ciliang neurotrophic factor,CNTF)抗體,採用Western blot免疫印跡法和ELISA檢測,觀察抗原抗體反應.結果 經凝膠過濾法分離的NRCF蛋白質,多集中在相對分子質量為(20～40)×103和220×103.相對分子質量為(20～40)×103蛋白帶中神經營養因子與抗NGF、抗BDNF、抗NT-3、抗CNTF等抗體反應,相對分子質量為220×103的蛋白帶所含神經營養因子僅與抗NT-4抗體反應.結論 NRCF中相對分子質量為220×103的蛋白帶僅與抗NT-4抗體反應,且生物活性遠彊于NT-4,該蛋白帶中可能存在一類新的神經活性因子.
목적 료해신경재생조건액(never regeneration conditioned fluid,NRCF)중단백질성분조성급상대분자질량위220×103적단백대중시부존재일류신적상미지적신경활성인자.방법 신서란대백토25지,체중1.8～2.5 kg,취좌골신경건립신경재생실모형.술후1주채집NRCF,채용응효과려법분리NRCF중단백질,주요분리상대분자질량위220×103적단백대,응용자연취병희선알응효전영(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)법검측기상대분자질량.병대취득적상대분자질량위220×103(a봉)화(20～40)×103(c봉)적단백대,분별응용이지적신경활성인자항체:항신경생장인자(nerve growth factor, NGF)항체、항효질세포원성신경영양인자(glial cell-derived neurotrophic factor, GDNF)항체、항뇌원신경영양인자(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)항체、항신경영양소3(neurotrophin 3,NT-3)항체、항NT-4항체、항첩상신경영양인자(ciliang neurotrophic factor,CNTF)항체,채용Western blot면역인적법화ELISA검측,관찰항원항체반응.결과 경응효과려법분리적NRCF단백질,다집중재상대분자질량위(20～40)×103화220×103.상대분자질량위(20～40)×103단백대중신경영양인자여항NGF、항BDNF、항NT-3、항CNTF등항체반응,상대분자질량위220×103적단백대소함신경영양인자부여항NT-4항체반응.결론 NRCF중상대분자질량위220×103적단백대부여항NT-4항체반응,차생물활성원강우NT-4,해단백대중가능존재일류신적신경활성인자.
