微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
5期
928-931
,共4页
孟春梅%吴建祥%谢礼%郑锦凯%洪健%周雪平
孟春梅%吳建祥%謝禮%鄭錦凱%洪健%週雪平
맹춘매%오건상%사례%정금개%홍건%주설평
建兰花叶病毒%单克隆抗体%ACP-ELISA
建蘭花葉病毒%單剋隆抗體%ACP-ELISA
건란화협병독%단극륭항체%ACP-ELISA
用建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得3株能稳定传代并分泌抗CymMV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(2C6、5B7和12G9),分别制备它们的单抗腹水.其中5B7和12G9 2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,3株单抗的抗体类型及亚类均为IgGl,轻链均为κ链.利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)检测CymMV的方法.蝴蝶兰病叶作1∶10240倍稀释、提纯CymMV病毒浓度为4.87ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.487ng)时,该方法仍能检测到病毒.利用ACP-ELISA方法检测了田间样品,发现CymMV在兰花上发病很普遍.
用建蘭花葉病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)免疫的BALB/C鼠脾細胞與SP2/0鼠骨髓瘤細胞融閤,經篩選剋隆,穫得3株能穩定傳代併分泌抗CymMV單剋隆抗體(McAb)的雜交瘤細胞(2C6、5B7和12G9),分彆製備它們的單抗腹水.其中5B7和12G9 2株單剋隆抗體腹水間接ELISA效價達10-6,3株單抗的抗體類型及亞類均為IgGl,輕鏈均為κ鏈.利用單剋隆抗體建立瞭抗原包被間接ELISA(ACP-ELISA)檢測CymMV的方法.蝴蝶蘭病葉作1∶10240倍稀釋、提純CymMV病毒濃度為4.87ng/mL(每孔的病毒絕對量為0.487ng)時,該方法仍能檢測到病毒.利用ACP-ELISA方法檢測瞭田間樣品,髮現CymMV在蘭花上髮病很普遍.
용건란화협병독(Cymbidium mosaic virus,CymMV)면역적BALB/C서비세포여SP2/0서골수류세포융합,경사선극륭,획득3주능은정전대병분비항CymMV단극륭항체(McAb)적잡교류세포(2C6、5B7화12G9),분별제비타문적단항복수.기중5B7화12G9 2주단극륭항체복수간접ELISA효개체10-6,3주단항적항체류형급아류균위IgGl,경련균위κ련.이용단극륭항체건립료항원포피간접ELISA(ACP-ELISA)검측CymMV적방법.호접란병협작1∶10240배희석、제순CymMV병독농도위4.87ng/mL(매공적병독절대량위0.487ng)시,해방법잉능검측도병독.이용ACP-ELISA방법검측료전간양품,발현CymMV재란화상발병흔보편.
