重庆工学院学报(自然科学版)
重慶工學院學報(自然科學版)
중경공학원학보(자연과학판)
JOURNAL OF CHONGQING INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2008年
12期
48-52
,共5页
鲁秀敏%朱枫%黄鹏%余瑛%王永堂
魯秀敏%硃楓%黃鵬%餘瑛%王永堂
로수민%주풍%황붕%여영%왕영당
p75神经营养素受体%荧光%重组表达%HEK293细胞
p75神經營養素受體%熒光%重組錶達%HEK293細胞
p75신경영양소수체%형광%중조표체%HEK293세포
构建了人p75神经营养素受体(p75 neurotmphin receptor,p75NTR)cDNA序列的绿色荧光真核表达载体,并鉴定其在人胚肾293(human embryo kiddy 293,HEK293)细胞中的表达.采用PCR方法从含人p75NTR的pDC316-HP75质粒中扩增目的片段,经EcoRI和SalI双酶切,定向克隆于pEGFP-N1质粒中,构建绿色荧光真核表达载体pEGFP-N1-HP75,经酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染HEK293细胞,激光共聚焦及Western blot法鉴定人p75NTR的表达.结果表明,酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有人p75NTR编码序列,转染实验表明,重组质粒能够在HEK293细胞中表达出具有活性的人p75NTR片段.
構建瞭人p75神經營養素受體(p75 neurotmphin receptor,p75NTR)cDNA序列的綠色熒光真覈錶達載體,併鑒定其在人胚腎293(human embryo kiddy 293,HEK293)細胞中的錶達.採用PCR方法從含人p75NTR的pDC316-HP75質粒中擴增目的片段,經EcoRI和SalI雙酶切,定嚮剋隆于pEGFP-N1質粒中,構建綠色熒光真覈錶達載體pEGFP-N1-HP75,經酶切及測序鑒定後,通過脂質體轉染HEK293細胞,激光共聚焦及Western blot法鑒定人p75NTR的錶達.結果錶明,酶切鑒定和序列分析證實重組質粒含有人p75NTR編碼序列,轉染實驗錶明,重組質粒能夠在HEK293細胞中錶達齣具有活性的人p75NTR片段.
구건료인p75신경영양소수체(p75 neurotmphin receptor,p75NTR)cDNA서렬적록색형광진핵표체재체,병감정기재인배신293(human embryo kiddy 293,HEK293)세포중적표체.채용PCR방법종함인p75NTR적pDC316-HP75질립중확증목적편단,경EcoRI화SalI쌍매절,정향극륭우pEGFP-N1질립중,구건록색형광진핵표체재체pEGFP-N1-HP75,경매절급측서감정후,통과지질체전염HEK293세포,격광공취초급Western blot법감정인p75NTR적표체.결과표명,매절감정화서렬분석증실중조질립함유인p75NTR편마서렬,전염실험표명,중조질립능구재HEK293세포중표체출구유활성적인p75NTR편단.
