中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2009年
5期
542-544
,共3页
李长锋%张斌%王志成%杨海山%潘奇正
李長鋒%張斌%王誌成%楊海山%潘奇正
리장봉%장빈%왕지성%양해산%반기정
RNA干扰%Survivin%流式细胞术%MTT%增殖
RNA榦擾%Survivin%流式細胞術%MTT%增殖
RNA간우%Survivin%류식세포술%MTT%증식
目的 构建靶向生存素(survivin)基因的RNA干扰(RNAi)载体,观察其联合X射线照射对肺腺癌A549细胞周期、凋亡及增殖影响.方法 根据GenBank中survivin的cDNA序列设计干扰序列,构建干扰survivin的重组干扰质粒pGenesil2-survivin.酶切、测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,联合5 Gy射线照射,应用PI单染、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡变化,MTT检测细胞增殖的变化.结果 酶切和测序结果显示,载体构建正确;转染空载体pGenesil2对细胞G0/G1期、S期及凋亡,增殖能力影响不大,降低了G2/M期(P＜0.05);而干扰质粒pGenesil2-survivin能延长G0/G1期,缩短S期,诱导细胞凋亡增加,降低细胞增殖能力(P＜0.05);5 Gy照射对细胞周期影响不大,增加细胞凋亡,降低增殖能力(P＜0.05);转染pGenesil2-survivin后,进行5 Gy X射线照射,延长G0/G1期,缩短S期,诱导细胞凋亡增加,降低细胞增殖能力(P＜0.05,P＜0.01).结论 靶向survivin的RNAi可延长G0/G1期,缩短S期,增加细胞凋亡,降低细胞增殖能力,X射线照射能够增强该质粒的作用.
目的 構建靶嚮生存素(survivin)基因的RNA榦擾(RNAi)載體,觀察其聯閤X射線照射對肺腺癌A549細胞週期、凋亡及增殖影響.方法 根據GenBank中survivin的cDNA序列設計榦擾序列,構建榦擾survivin的重組榦擾質粒pGenesil2-survivin.酶切、測序鑒定正確後,榦擾質粒經脂質體介導轉染肺腺癌A549細胞,聯閤5 Gy射線照射,應用PI單染、流式細胞儀檢測細胞週期與凋亡變化,MTT檢測細胞增殖的變化.結果 酶切和測序結果顯示,載體構建正確;轉染空載體pGenesil2對細胞G0/G1期、S期及凋亡,增殖能力影響不大,降低瞭G2/M期(P＜0.05);而榦擾質粒pGenesil2-survivin能延長G0/G1期,縮短S期,誘導細胞凋亡增加,降低細胞增殖能力(P＜0.05);5 Gy照射對細胞週期影響不大,增加細胞凋亡,降低增殖能力(P＜0.05);轉染pGenesil2-survivin後,進行5 Gy X射線照射,延長G0/G1期,縮短S期,誘導細胞凋亡增加,降低細胞增殖能力(P＜0.05,P＜0.01).結論 靶嚮survivin的RNAi可延長G0/G1期,縮短S期,增加細胞凋亡,降低細胞增殖能力,X射線照射能夠增彊該質粒的作用.
목적 구건파향생존소(survivin)기인적RNA간우(RNAi)재체,관찰기연합X사선조사대폐선암A549세포주기、조망급증식영향.방법 근거GenBank중survivin적cDNA서렬설계간우서렬,구건간우survivin적중조간우질립pGenesil2-survivin.매절、측서감정정학후,간우질립경지질체개도전염폐선암A549세포,연합5 Gy사선조사,응용PI단염、류식세포의검측세포주기여조망변화,MTT검측세포증식적변화.결과 매절화측서결과현시,재체구건정학;전염공재체pGenesil2대세포G0/G1기、S기급조망,증식능력영향불대,강저료G2/M기(P＜0.05);이간우질립pGenesil2-survivin능연장G0/G1기,축단S기,유도세포조망증가,강저세포증식능력(P＜0.05);5 Gy조사대세포주기영향불대,증가세포조망,강저증식능력(P＜0.05);전염pGenesil2-survivin후,진행5 Gy X사선조사,연장G0/G1기,축단S기,유도세포조망증가,강저세포증식능력(P＜0.05,P＜0.01).결론 파향survivin적RNAi가연장G0/G1기,축단S기,증가세포조망,강저세포증식능력,X사선조사능구증강해질립적작용.
