广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY
2011年
1期
38-41
,共4页
袁锡华%曹存巍%刘伟%李若瑜
袁錫華%曹存巍%劉偉%李若瑜
원석화%조존외%류위%리약유
马尔尼菲青霉%氧化应激反应%SKN7%克隆%基因
馬爾尼菲青黴%氧化應激反應%SKN7%剋隆%基因
마이니비청매%양화응격반응%SKN7%극륭%기인
目的:克隆双相真菌马尔尼菲青霉(PM)的氧化应激反应相关基因SKN7,并通过对酵母SKN7缺陷株的互补试验证明该基因是氧化应激反应相关基因.方法:提取PM标准株DNA及RNA后,通过简并PCR结合RACE技术克隆PM的SKN7基因;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)比较该基因在25℃及37'C温度下的表达;将该基因的cDNA插入酵母表达载体pY-ES2.0,转化酿酒酵母SKN7基因缺陷株,比较互补后酿酒酵母SKN7基因缺陷株对H2O2的抵抗能力是否增强.结果:PM的SKN7基因全长约2.5 kb,开放读码框为1 776 bp,推测编码592个氨基酸;包含4个内含子5个外显子及两个高度保守的结构域.该基因在双相温度表达量无变化,互补试验证明转化PM的SKN7基因后酿酒酵母SKN7基因缺陷株重新具有抵抗H2O2:杀伤的能力.结论:PM的SKN7基因是氧化应激反应相关基因,但并不是酵母相特异表达基因.
目的:剋隆雙相真菌馬爾尼菲青黴(PM)的氧化應激反應相關基因SKN7,併通過對酵母SKN7缺陷株的互補試驗證明該基因是氧化應激反應相關基因.方法:提取PM標準株DNA及RNA後,通過簡併PCR結閤RACE技術剋隆PM的SKN7基因;實時熒光定量PCR(Real-time PCR)比較該基因在25℃及37'C溫度下的錶達;將該基因的cDNA插入酵母錶達載體pY-ES2.0,轉化釀酒酵母SKN7基因缺陷株,比較互補後釀酒酵母SKN7基因缺陷株對H2O2的牴抗能力是否增彊.結果:PM的SKN7基因全長約2.5 kb,開放讀碼框為1 776 bp,推測編碼592箇氨基痠;包含4箇內含子5箇外顯子及兩箇高度保守的結構域.該基因在雙相溫度錶達量無變化,互補試驗證明轉化PM的SKN7基因後釀酒酵母SKN7基因缺陷株重新具有牴抗H2O2:殺傷的能力.結論:PM的SKN7基因是氧化應激反應相關基因,但併不是酵母相特異錶達基因.
목적:극륭쌍상진균마이니비청매(PM)적양화응격반응상관기인SKN7,병통과대효모SKN7결함주적호보시험증명해기인시양화응격반응상관기인.방법:제취PM표준주DNA급RNA후,통과간병PCR결합RACE기술극륭PM적SKN7기인;실시형광정량PCR(Real-time PCR)비교해기인재25℃급37'C온도하적표체;장해기인적cDNA삽입효모표체재체pY-ES2.0,전화양주효모SKN7기인결함주,비교호보후양주효모SKN7기인결함주대H2O2적저항능력시부증강.결과:PM적SKN7기인전장약2.5 kb,개방독마광위1 776 bp,추측편마592개안기산;포함4개내함자5개외현자급량개고도보수적결구역.해기인재쌍상온도표체량무변화,호보시험증명전화PM적SKN7기인후양주효모SKN7기인결함주중신구유저항H2O2:살상적능력.결론:PM적SKN7기인시양화응격반응상관기인,단병불시효모상특이표체기인.
