热带亚热带植物学报
熱帶亞熱帶植物學報
열대아열대식물학보
JOURNAL OF TROPICAL AND SUBTROPICAL BOTANY
2011年
3期
267-272
,共6页
朱聪聪%张乃升%谢伟红%牛莹芳%杨维东%刘洁生%李宏业
硃聰聰%張迺升%謝偉紅%牛瑩芳%楊維東%劉潔生%李宏業
주총총%장내승%사위홍%우형방%양유동%류길생%리굉업
三角褐指藻%叶绿体转化%同源重组%电穿孔法
三角褐指藻%葉綠體轉化%同源重組%電穿孔法
삼각갈지조%협록체전화%동원중조%전천공법
为建立三角褐指藻(Phaeodacty lum tricornutum)叶绿体表达体系,从其叶绿体基因组中克隆了rnS-trnI、trnAml序列作为遗传转化同源重组序列,并以氯霉素抗性基因(CAT)表达盒作为筛选标记,以及绿色荧光蛋白基因(GFP)表达盒作为报告基因.以TA克隆载体pMD19-T为基础,将CAT表达盒以及GFP表达盒连接到rns-trnI/trnA-rnl两个同源重组片段之间,构建得到含有报告基因GFP表达盒的三角褐指藻叶绿体表达载体,利用电穿孔法将载体导入三角褐指藻叶绿体.对转化藻进行抗性筛选以及报告基因的检测,结果表明,外源基因CAT在转化藻中得到表达并提供抗性,报告基因GFP成功地在叶绿体中表达.
為建立三角褐指藻(Phaeodacty lum tricornutum)葉綠體錶達體繫,從其葉綠體基因組中剋隆瞭rnS-trnI、trnAml序列作為遺傳轉化同源重組序列,併以氯黴素抗性基因(CAT)錶達盒作為篩選標記,以及綠色熒光蛋白基因(GFP)錶達盒作為報告基因.以TA剋隆載體pMD19-T為基礎,將CAT錶達盒以及GFP錶達盒連接到rns-trnI/trnA-rnl兩箇同源重組片段之間,構建得到含有報告基因GFP錶達盒的三角褐指藻葉綠體錶達載體,利用電穿孔法將載體導入三角褐指藻葉綠體.對轉化藻進行抗性篩選以及報告基因的檢測,結果錶明,外源基因CAT在轉化藻中得到錶達併提供抗性,報告基因GFP成功地在葉綠體中錶達.
위건립삼각갈지조(Phaeodacty lum tricornutum)협록체표체체계,종기협록체기인조중극륭료rnS-trnI、trnAml서렬작위유전전화동원중조서렬,병이록매소항성기인(CAT)표체합작위사선표기,이급록색형광단백기인(GFP)표체합작위보고기인.이TA극륭재체pMD19-T위기출,장CAT표체합이급GFP표체합련접도rns-trnI/trnA-rnl량개동원중조편단지간,구건득도함유보고기인GFP표체합적삼각갈지조협록체표체재체,이용전천공법장재체도입삼각갈지조협록체.대전화조진행항성사선이급보고기인적검측,결과표명,외원기인CAT재전화조중득도표체병제공항성,보고기인GFP성공지재협록체중표체.
