交通医学
交通醫學
교통의학
MEDICAL JOURNAL OF COMMUNICATIONS
2012年
1期
4-9
,共6页
钱玉燕%李冬辉%张加吉%刘梅%刘炎
錢玉燕%李鼕輝%張加吉%劉梅%劉炎
전옥연%리동휘%장가길%류매%류염
血管活性肠肽%壁虎%脊髓%断尾损伤%再生%实时定量聚合酶链反应
血管活性腸肽%壁虎%脊髓%斷尾損傷%再生%實時定量聚閤酶鏈反應
혈관활성장태%벽호%척수%단미손상%재생%실시정량취합매련반응
目的:克隆多疣壁虎血管活性肠肽(VIP)的cDNA全长序列,研究VIP在正常壁虎各组织中的表达及断尾损伤后脊髓再生过程中的表达变化.方法:通过对多疣壁虎断尾损伤cDNA文库克隆测序获得VIP基因序列.通过Northern blot验证VIP转录本的大小,通过原位杂交检测VIP mRNA在正常壁虎脊髓中的分布.制备壁虎断尾损伤模型,通过采用Real time-PCR和原位杂交的方法检测VIP mRNA在壁虎损伤模型断端近侧脊髓中的表达变化.结果:VIP mRNA全长1933 bp,编码156个氨基酸的前原蛋白.编码的成熟肽与其他物种的同源性约为82.1％.RTPCR和Northern blot显示VIP在正常壁虎组织中广泛表达,且通过Northern blot发现正常壁虎体内只一个转录本,大小约1.9kb.原位杂交结果显示VIP阳性信号主要分布于脊髓灰质中,白质中仅有少量表达.Real-time PCR和原位杂交结果表明断尾损伤后的近端脊髓组织中VIP表达呈动态变化.结论:获得壁虎VIP全长mRNA序列的基本特征及其多组织表达图谱.VIP在壁虎的脊髓中主要分布于灰质中,壁虎在断尾损伤后近端脊髓VIP的表达呈动态变化.
目的:剋隆多疣壁虎血管活性腸肽(VIP)的cDNA全長序列,研究VIP在正常壁虎各組織中的錶達及斷尾損傷後脊髓再生過程中的錶達變化.方法:通過對多疣壁虎斷尾損傷cDNA文庫剋隆測序穫得VIP基因序列.通過Northern blot驗證VIP轉錄本的大小,通過原位雜交檢測VIP mRNA在正常壁虎脊髓中的分佈.製備壁虎斷尾損傷模型,通過採用Real time-PCR和原位雜交的方法檢測VIP mRNA在壁虎損傷模型斷耑近側脊髓中的錶達變化.結果:VIP mRNA全長1933 bp,編碼156箇氨基痠的前原蛋白.編碼的成熟肽與其他物種的同源性約為82.1％.RTPCR和Northern blot顯示VIP在正常壁虎組織中廣汎錶達,且通過Northern blot髮現正常壁虎體內隻一箇轉錄本,大小約1.9kb.原位雜交結果顯示VIP暘性信號主要分佈于脊髓灰質中,白質中僅有少量錶達.Real-time PCR和原位雜交結果錶明斷尾損傷後的近耑脊髓組織中VIP錶達呈動態變化.結論:穫得壁虎VIP全長mRNA序列的基本特徵及其多組織錶達圖譜.VIP在壁虎的脊髓中主要分佈于灰質中,壁虎在斷尾損傷後近耑脊髓VIP的錶達呈動態變化.
목적:극륭다우벽호혈관활성장태(VIP)적cDNA전장서렬,연구VIP재정상벽호각조직중적표체급단미손상후척수재생과정중적표체변화.방법:통과대다우벽호단미손상cDNA문고극륭측서획득VIP기인서렬.통과Northern blot험증VIP전록본적대소,통과원위잡교검측VIP mRNA재정상벽호척수중적분포.제비벽호단미손상모형,통과채용Real time-PCR화원위잡교적방법검측VIP mRNA재벽호손상모형단단근측척수중적표체변화.결과:VIP mRNA전장1933 bp,편마156개안기산적전원단백.편마적성숙태여기타물충적동원성약위82.1％.RTPCR화Northern blot현시VIP재정상벽호조직중엄범표체,차통과Northern blot발현정상벽호체내지일개전록본,대소약1.9kb.원위잡교결과현시VIP양성신호주요분포우척수회질중,백질중부유소량표체.Real-time PCR화원위잡교결과표명단미손상후적근단척수조직중VIP표체정동태변화.결론:획득벽호VIP전장mRNA서렬적기본특정급기다조직표체도보.VIP재벽호적척수중주요분포우회질중,벽호재단미손상후근단척수VIP적표체정동태변화.
