中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2012年
1期
84-87
,共4页
刘先菊%林树柱%杨帆%佟巍%刘云波
劉先菊%林樹柱%楊帆%佟巍%劉雲波
류선국%림수주%양범%동외%류운파
金黄地鼠%IgG纯化%酶标抗体
金黃地鼠%IgG純化%酶標抗體
금황지서%IgG순화%매표항체
目的 纯化金黄地鼠血清IgG,制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(IgG-HRP),开展金黄地鼠仙台病毒的初步检测.方法 采用亲和层析纯化法纯化金黄地鼠IgG,用SDS- PAGE电泳测定IgG纯度并制备兔抗金黄地鼠IgG抗体(second antibody,Ab2)；用免疫双扩散法检测抗血清效价后,再用亲和层析纯化抗血清IgG( Ab2)；采用改良过碘酸钠标记法制备兔抗金黄地鼠酶标抗体( rabbit anti-hamster IgG-HRP)；用直接ELISA和Western-blot法对兔抗金黄地鼠IgG酶标抗体进行工作浓度测定；应用金黄地鼠酶标抗体对金黄地鼠仙台病毒进行酶免检测(IEA).结果 金黄地鼠血清IgG纯度达95％；兔抗金黄地鼠IgG抗体(Ab2)免疫双扩散效价为1(:)64;兔抗金黄地鼠IgG -HRP经直接ELISA和Western-Blot测定工作浓度分别为1∶5000和1∶2000；酶免(IEA)效价为1:2000.结论 高效快速纯化了金黄地鼠IgG,制备了金黄地鼠IgG-HRP,为金黄地鼠病原微生物的血清学检测提供了条件.
目的 純化金黃地鼠血清IgG,製備兔抗金黃地鼠酶標抗體(IgG-HRP),開展金黃地鼠仙檯病毒的初步檢測.方法 採用親和層析純化法純化金黃地鼠IgG,用SDS- PAGE電泳測定IgG純度併製備兔抗金黃地鼠IgG抗體(second antibody,Ab2)；用免疫雙擴散法檢測抗血清效價後,再用親和層析純化抗血清IgG( Ab2)；採用改良過碘痠鈉標記法製備兔抗金黃地鼠酶標抗體( rabbit anti-hamster IgG-HRP)；用直接ELISA和Western-blot法對兔抗金黃地鼠IgG酶標抗體進行工作濃度測定；應用金黃地鼠酶標抗體對金黃地鼠仙檯病毒進行酶免檢測(IEA).結果 金黃地鼠血清IgG純度達95％；兔抗金黃地鼠IgG抗體(Ab2)免疫雙擴散效價為1(:)64;兔抗金黃地鼠IgG -HRP經直接ELISA和Western-Blot測定工作濃度分彆為1∶5000和1∶2000；酶免(IEA)效價為1:2000.結論 高效快速純化瞭金黃地鼠IgG,製備瞭金黃地鼠IgG-HRP,為金黃地鼠病原微生物的血清學檢測提供瞭條件.
목적 순화금황지서혈청IgG,제비토항금황지서매표항체(IgG-HRP),개전금황지서선태병독적초보검측.방법 채용친화층석순화법순화금황지서IgG,용SDS- PAGE전영측정IgG순도병제비토항금황지서IgG항체(second antibody,Ab2)；용면역쌍확산법검측항혈청효개후,재용친화층석순화항혈청IgG( Ab2)；채용개량과전산납표기법제비토항금황지서매표항체( rabbit anti-hamster IgG-HRP)；용직접ELISA화Western-blot법대토항금황지서IgG매표항체진행공작농도측정；응용금황지서매표항체대금황지서선태병독진행매면검측(IEA).결과 금황지서혈청IgG순도체95％；토항금황지서IgG항체(Ab2)면역쌍확산효개위1(:)64;토항금황지서IgG -HRP경직접ELISA화Western-Blot측정공작농도분별위1∶5000화1∶2000；매면(IEA)효개위1:2000.결론 고효쾌속순화료금황지서IgG,제비료금황지서IgG-HRP,위금황지서병원미생물적혈청학검측제공료조건.
