军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2012年
9期
662-665
,共4页
张雨%司炳银%刘伯华%杨银辉%祝庆余
張雨%司炳銀%劉伯華%楊銀輝%祝慶餘
장우%사병은%류백화%양은휘%축경여
马雅罗病毒%基因组%逆转录聚合酶链反应
馬雅囉病毒%基因組%逆轉錄聚閤酶鏈反應
마아라병독%기인조%역전록취합매련반응
目的 对保存的WJBC株马雅罗病毒(MAYV)基因组序列进行测定,阐明其与已报道毒株的关系及追溯其可能来源.方法 将MAYV基因组编码区分10段进行RT-PCR扩增,扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化并连接pGEM-T easy载体后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定后进行测序,用DNAStar软件将测序结果拼接得到基因组序列.下载MAYV核苷酸序列,利用MEGA5.0软件构建系统进化发生树.结果与结论 WJBC株MAYV基因组核苷酸(nt)共11429 nt,编码3679个氨基酸,其中5’端的2/3基因组编码4种非结构蛋白nsP1,nsP2,nsP3,nsP4；3’端的1/3基因组编码5种结构蛋白C、E3、E2、6K和E1蛋白.结构基因和非结构基因之间有26 nt的连接区为非翻译区.病毒基因组5’端和3’端分别有76、290 nt的非编码区.进化树结果显示,WJBC株马雅罗病毒与TRVL4675株MAYV亲缘性最高.
目的 對保存的WJBC株馬雅囉病毒(MAYV)基因組序列進行測定,闡明其與已報道毒株的關繫及追溯其可能來源.方法 將MAYV基因組編碼區分10段進行RT-PCR擴增,擴增產物直接進行測序,非編碼區採用RACE法進行擴增,擴增產物純化併連接pGEM-T easy載體後轉化大腸桿菌DH5α感受態細胞,挑取暘性剋隆鑒定後進行測序,用DNAStar軟件將測序結果拼接得到基因組序列.下載MAYV覈苷痠序列,利用MEGA5.0軟件構建繫統進化髮生樹.結果與結論 WJBC株MAYV基因組覈苷痠(nt)共11429 nt,編碼3679箇氨基痠,其中5’耑的2/3基因組編碼4種非結構蛋白nsP1,nsP2,nsP3,nsP4；3’耑的1/3基因組編碼5種結構蛋白C、E3、E2、6K和E1蛋白.結構基因和非結構基因之間有26 nt的連接區為非翻譯區.病毒基因組5’耑和3’耑分彆有76、290 nt的非編碼區.進化樹結果顯示,WJBC株馬雅囉病毒與TRVL4675株MAYV親緣性最高.
목적 대보존적WJBC주마아라병독(MAYV)기인조서렬진행측정,천명기여이보도독주적관계급추소기가능래원.방법 장MAYV기인조편마구분10단진행RT-PCR확증,확증산물직접진행측서,비편마구채용RACE법진행확증,확증산물순화병련접pGEM-T easy재체후전화대장간균DH5α감수태세포,도취양성극륭감정후진행측서,용DNAStar연건장측서결과병접득도기인조서렬.하재MAYV핵감산서렬,이용MEGA5.0연건구건계통진화발생수.결과여결론 WJBC주MAYV기인조핵감산(nt)공11429 nt,편마3679개안기산,기중5’단적2/3기인조편마4충비결구단백nsP1,nsP2,nsP3,nsP4；3’단적1/3기인조편마5충결구단백C、E3、E2、6K화E1단백.결구기인화비결구기인지간유26 nt적련접구위비번역구.병독기인조5’단화3’단분별유76、290 nt적비편마구.진화수결과현시,WJBC주마아라병독여TRVL4675주MAYV친연성최고.
