西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
9期
1719-1725
,共7页
张秀娟%杨冠宇%石蕊%韩晓敏%王瑞刚%李国婧
張秀娟%楊冠宇%石蕊%韓曉敏%王瑞剛%李國婧
장수연%양관우%석예%한효민%왕서강%리국청
拟南芥%CRK45%差异表达%钙离子%CICBP
擬南芥%CRK45%差異錶達%鈣離子%CICBP
의남개%CRK45%차이표체%개리자%CICBP
以拟南芥野生型和类受体蛋白激酶基因CRK45的T-DNA插入突变体crk45为材料,采用差异基因表达筛选技术检测ABA处理后野生型和crk45中基因表达的差异.结果显示:(1)crk45突变体中有1个基因的表达比野生型高约4倍.(2)NCBI数据库检索表明,该基因编码的蛋白具有EF手型结构,蛋白序列全长为130个氨基酸,是典型的Ca2+结合蛋白,故命名为CRK45抑制的钙离子结合蛋白(CICBP).(3) Northern blotting分析结果显示,ABA处理后crk45突变体中CICBP的表达明显升高,证明CICBP基因的确受ABA诱导,且其表达受CRK45的抑制.(4)外源75 mmol/L的Ca2+处理后,crk45突变体的萌发率(30.8％)显著高于野生型(17.16％),说明在Ca2+介导下CRK45的功能是抑制种子萌发.(5) qRT-PCR检测显示,野生型中CRK45的表达受Ca2+诱导明显升高,而crk45突变体中的表达一直保持很低,说明crk45突变体是一个基因敲除突变体;Ca2+处理后crk45突变体中CICBP基因表达上调,而野生型中CICBP的表达反而降低,说明Ca2+处理下CRK45抑制CICBP基因的表达.研究表明,ABA或Ca2+处理后,CRK45通过负调控CICBP基因的表达,从而抑制拟南芥种子萌发.
以擬南芥野生型和類受體蛋白激酶基因CRK45的T-DNA插入突變體crk45為材料,採用差異基因錶達篩選技術檢測ABA處理後野生型和crk45中基因錶達的差異.結果顯示:(1)crk45突變體中有1箇基因的錶達比野生型高約4倍.(2)NCBI數據庫檢索錶明,該基因編碼的蛋白具有EF手型結構,蛋白序列全長為130箇氨基痠,是典型的Ca2+結閤蛋白,故命名為CRK45抑製的鈣離子結閤蛋白(CICBP).(3) Northern blotting分析結果顯示,ABA處理後crk45突變體中CICBP的錶達明顯升高,證明CICBP基因的確受ABA誘導,且其錶達受CRK45的抑製.(4)外源75 mmol/L的Ca2+處理後,crk45突變體的萌髮率(30.8％)顯著高于野生型(17.16％),說明在Ca2+介導下CRK45的功能是抑製種子萌髮.(5) qRT-PCR檢測顯示,野生型中CRK45的錶達受Ca2+誘導明顯升高,而crk45突變體中的錶達一直保持很低,說明crk45突變體是一箇基因敲除突變體;Ca2+處理後crk45突變體中CICBP基因錶達上調,而野生型中CICBP的錶達反而降低,說明Ca2+處理下CRK45抑製CICBP基因的錶達.研究錶明,ABA或Ca2+處理後,CRK45通過負調控CICBP基因的錶達,從而抑製擬南芥種子萌髮.
이의남개야생형화류수체단백격매기인CRK45적T-DNA삽입돌변체crk45위재료,채용차이기인표체사선기술검측ABA처리후야생형화crk45중기인표체적차이.결과현시:(1)crk45돌변체중유1개기인적표체비야생형고약4배.(2)NCBI수거고검색표명,해기인편마적단백구유EF수형결구,단백서렬전장위130개안기산,시전형적Ca2+결합단백,고명명위CRK45억제적개리자결합단백(CICBP).(3) Northern blotting분석결과현시,ABA처리후crk45돌변체중CICBP적표체명현승고,증명CICBP기인적학수ABA유도,차기표체수CRK45적억제.(4)외원75 mmol/L적Ca2+처리후,crk45돌변체적맹발솔(30.8％)현저고우야생형(17.16％),설명재Ca2+개도하CRK45적공능시억제충자맹발.(5) qRT-PCR검측현시,야생형중CRK45적표체수Ca2+유도명현승고,이crk45돌변체중적표체일직보지흔저,설명crk45돌변체시일개기인고제돌변체;Ca2+처리후crk45돌변체중CICBP기인표체상조,이야생형중CICBP적표체반이강저,설명Ca2+처리하CRK45억제CICBP기인적표체.연구표명,ABA혹Ca2+처리후,CRK45통과부조공CICBP기인적표체,종이억제의남개충자맹발.
