CAJ | 학술논문

目的研究LRRC4基因的抑瘤作用,探讨LRRC4基因对U251细胞的生物学功能影响.方法将转染LRRC4基因的U251细胞、转染空白载体PcDNA3.1(+)的U251细胞和阴性对照的U251细胞分别进行HE染色、DNA染色和核仁组成区嗜银蛋白(AgNORs)染色,并采用图像分析系统分别进行平面形态参数、DNA含量、DNA倍体、细胞周期和AgNORs定量分析,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期分布,MTT检测各组细胞的增殖活性.结果转染LRRC4基因U251细胞的面积为(100.6±7.6) μm2,周长为(42.4±2.0) μm,细胞直径为(9.0±1.2) μm,平均DNA含量为(46.8±8.7) pg,AgNORs平均颗粒数为(1.2±0.4)个,AgNORs平均面积为(16.9±2.0) μm2,均显著低于转染空白载体和阴性对照细胞,DNA异倍体也显著低于转染空白载体和阴性对照细胞.转染LRRC4基因的U251细胞的G0/G1期百分比明显增高,而S期和G2/M期细胞减少.转染LRRC4基因的U251细胞增殖活性显著低于转染空白载体和阴性对照细胞(P<0.01).结论 LRRC4基因通过抑制细胞的DNA复制,减少细胞核仁组成区相关蛋白质的合成,使细胞停滞于G0/G1期,抑制细胞的增殖活性,进而发挥抑瘤功能.形态定量检测技术结合流式细胞检测、MTT检测等实验,能更加全面地阐明新基因的生物学功能.
목적연구LRRC4기인적억류작용,탐토LRRC4기인대U251세포적생물학공능영향.방법장전염LRRC4기인적U251세포、전염공백재체PcDNA3.1(+)적U251세포화음성대조적U251세포분별진행HE염색、DNA염색화핵인조성구기은단백(AgNORs)염색,병채용도상분석계통분별진행평면형태삼수、DNA함량、DNA배체、세포주기화AgNORs정량분석,류식세포의검측각조세포적세포주기분포,MTT검측각조세포적증식활성.결과전염LRRC4기인U251세포적면적위(100.6±7.6) μm2,주장위(42.4±2.0) μm,세포직경위(9.0±1.2) μm,평균DNA함량위(46.8±8.7) pg,AgNORs평균과립수위(1.2±0.4)개,AgNORs평균면적위(16.9±2.0) μm2,균현저저우전염공백재체화음성대조세포,DNA이배체야현저저우전염공백재체화음성대조세포.전염LRRC4기인적U251세포적G0/G1기백분비명현증고,이S기화G2/M기세포감소.전염LRRC4기인적U251세포증식활성현저저우전염공백재체화음성대조세포(P<0.01).결론 LRRC4기인통과억제세포적DNA복제,감소세포핵인조성구상관단백질적합성,사세포정체우G0/G1기,억제세포적증식활성,진이발휘억류공능.형태정량검측기술결합류식세포검측、MTT검측등실험,능경가전면지천명신기인적생물학공능.