第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
8期
706-708
,共3页
杨东%曹红卫%伏建峰%王宁%刘鑫%郑新川%鲁永玲%郑江
楊東%曹紅衛%伏建峰%王寧%劉鑫%鄭新川%魯永玲%鄭江
양동%조홍위%복건봉%왕저%류흠%정신천%로영령%정강
栀子%生物传感器%内毒素类%鲎试验%TNF-α
梔子%生物傳感器%內毒素類%鱟試驗%TNF-α
치자%생물전감기%내독소류%후시험%TNF-α
目的 从中药栀子中提取抗内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的有效成分并进行活性初步分析.方法 运用大孔树脂AB-8、聚酰胺树脂、萃取技术及高效液相色谱分离技术对栀子水提物进行分离;通过测定他与lipid A的结合强弱对分离过程进行跟踪,获得粗组分D,经过HPLC技术进一步获得与lipid A有较强结合活性的组分CJ-1;动态比浊法鲎试验检测组分CJ-1在不同浓度(0.5、1、2 mg/L)对LPS(0.2μg/L)的中和作用;ELISA法检测CJ-1组分对LPS(100μg/L)刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.结果 从中药栀子中逐步分离出与lipid A结合活性较高的组分CJ-1,当CJ-1浓度为0.2 g/L时,RU值为112 arc/s;CJ-1浓度为0.5～2.0 mg/L时,对0.2μg/L LPS介导的鲎试剂的凝结反应具有显著的抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),并呈剂量效应关系;CJ-1浓度为50～200 mg/L时,对100μg/L的LPS介导的RAW264.7细胞释放TNF-α具有显著的抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),并呈剂量效应关系.结论 依靠lipidA为靶点指导中药栀子水煎液分离,从中分离提取出与lipid A的结合作用较强的组分CJ-1,CJ-1在体外对LPS具有一定的中和作用.
目的 從中藥梔子中提取抗內毒素(lipopolysaccharide,LPS)的有效成分併進行活性初步分析.方法 運用大孔樹脂AB-8、聚酰胺樹脂、萃取技術及高效液相色譜分離技術對梔子水提物進行分離;通過測定他與lipid A的結閤彊弱對分離過程進行跟蹤,穫得粗組分D,經過HPLC技術進一步穫得與lipid A有較彊結閤活性的組分CJ-1;動態比濁法鱟試驗檢測組分CJ-1在不同濃度(0.5、1、2 mg/L)對LPS(0.2μg/L)的中和作用;ELISA法檢測CJ-1組分對LPS(100μg/L)刺激RAW264.7細胞釋放腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的影響.結果 從中藥梔子中逐步分離齣與lipid A結閤活性較高的組分CJ-1,噹CJ-1濃度為0.2 g/L時,RU值為112 arc/s;CJ-1濃度為0.5～2.0 mg/L時,對0.2μg/L LPS介導的鱟試劑的凝結反應具有顯著的抑製作用(P＜0.01,P＜0.05),併呈劑量效應關繫;CJ-1濃度為50～200 mg/L時,對100μg/L的LPS介導的RAW264.7細胞釋放TNF-α具有顯著的抑製作用(P＜0.01,P＜0.05),併呈劑量效應關繫.結論 依靠lipidA為靶點指導中藥梔子水煎液分離,從中分離提取齣與lipid A的結閤作用較彊的組分CJ-1,CJ-1在體外對LPS具有一定的中和作用.
목적 종중약치자중제취항내독소(lipopolysaccharide,LPS)적유효성분병진행활성초보분석.방법 운용대공수지AB-8、취선알수지、췌취기술급고효액상색보분리기술대치자수제물진행분리;통과측정타여lipid A적결합강약대분리과정진행근종,획득조조분D,경과HPLC기술진일보획득여lipid A유교강결합활성적조분CJ-1;동태비탁법후시험검측조분CJ-1재불동농도(0.5、1、2 mg/L)대LPS(0.2μg/L)적중화작용;ELISA법검측CJ-1조분대LPS(100μg/L)자격RAW264.7세포석방종류배사인자-α(TNF-α)적영향.결과 종중약치자중축보분리출여lipid A결합활성교고적조분CJ-1,당CJ-1농도위0.2 g/L시,RU치위112 arc/s;CJ-1농도위0.5～2.0 mg/L시,대0.2μg/L LPS개도적후시제적응결반응구유현저적억제작용(P＜0.01,P＜0.05),병정제량효응관계;CJ-1농도위50～200 mg/L시,대100μg/L적LPS개도적RAW264.7세포석방TNF-α구유현저적억제작용(P＜0.01,P＜0.05),병정제량효응관계.결론 의고lipidA위파점지도중약치자수전액분리,종중분리제취출여lipid A적결합작용교강적조분CJ-1,CJ-1재체외대LPS구유일정적중화작용.
