中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
2期
226-230
,共5页
陈雪彦%刘焕龙%潘振华%张永健
陳雪彥%劉煥龍%潘振華%張永健
진설언%류환룡%반진화%장영건
间尼索地平%5-羟色胺%肺动脉平滑肌细胞%增殖%迁移%细胞外信号调节激酶
間尼索地平%5-羥色胺%肺動脈平滑肌細胞%增殖%遷移%細胞外信號調節激酶
간니색지평%5-간색알%폐동맥평활기세포%증식%천이%세포외신호조절격매
m-Nisoldipine%5-hydrocrotaline(5-HT)%PASMCs%proliferation%migration%ERK1/2
目的 探讨间尼索地平(m-Nis)对5-羟色胺(5-HT)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和迁移的影响,并深入研究其作用机制.方法 采用植块法培养大鼠PASMCs.实验分为6组:空白对照组、5-HT(1 μmol·L~(-1))组,m-Nis(10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8) mol·L~(-1))组.噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell迁移小室法分别测定PASMCs的增殖和迁移,Western blot法检测大鼠PASMCs中增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达及细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)的磷酸化水平,研究m-Nis对ERK1/2/MAPK信号通路的影响.结果 不同浓度m-Nis明显抑制了5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖(P<0.05或P<0.01)和迁移(P<0.01),并呈现一定的浓度依赖性;另外,Western blot结果 显示m-Nis对5-HT诱导的大鼠PASMCs中PCNA的蛋白表达有不同程度的抑制作用(P<0.05或P<0.01),10~(-5),10~(-6),10~(-7) mol·L~(-1) m-Nis还明显抑制了5-HT诱导的大鼠PASMCs中ERK1/2磷酸化水平的升高,p-ERK1/2/ERK1/2比值均有不同程度地降低(P<0.05或P<0.01).结论 m-Nis对5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖和迁移有明显的抑制作用,可能与其抑制PCNA蛋白表达及ERK1/2/MAPK信号通路有关.
目的 探討間尼索地平(m-Nis)對5-羥色胺(5-HT)誘導的大鼠肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)增殖和遷移的影響,併深入研究其作用機製.方法 採用植塊法培養大鼠PASMCs.實驗分為6組:空白對照組、5-HT(1 μmol·L~(-1))組,m-Nis(10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8) mol·L~(-1))組.噻唑藍(MTT)比色法、Transwell遷移小室法分彆測定PASMCs的增殖和遷移,Western blot法檢測大鼠PASMCs中增殖細胞覈抗原(PCNA)的蛋白錶達及細胞外信號調節激酶1和2(ERK1/2)的燐痠化水平,研究m-Nis對ERK1/2/MAPK信號通路的影響.結果 不同濃度m-Nis明顯抑製瞭5-HT誘導的大鼠PASMCs增殖(P<0.05或P<0.01)和遷移(P<0.01),併呈現一定的濃度依賴性;另外,Western blot結果 顯示m-Nis對5-HT誘導的大鼠PASMCs中PCNA的蛋白錶達有不同程度的抑製作用(P<0.05或P<0.01),10~(-5),10~(-6),10~(-7) mol·L~(-1) m-Nis還明顯抑製瞭5-HT誘導的大鼠PASMCs中ERK1/2燐痠化水平的升高,p-ERK1/2/ERK1/2比值均有不同程度地降低(P<0.05或P<0.01).結論 m-Nis對5-HT誘導的大鼠PASMCs增殖和遷移有明顯的抑製作用,可能與其抑製PCNA蛋白錶達及ERK1/2/MAPK信號通路有關.
목적 탐토간니색지평(m-Nis)대5-간색알(5-HT)유도적대서폐동맥평활기세포(PASMCs)증식화천이적영향,병심입연구기작용궤제.방법 채용식괴법배양대서PASMCs.실험분위6조:공백대조조、5-HT(1 μmol·L~(-1))조,m-Nis(10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8) mol·L~(-1))조.새서람(MTT)비색법、Transwell천이소실법분별측정PASMCs적증식화천이,Western blot법검측대서PASMCs중증식세포핵항원(PCNA)적단백표체급세포외신호조절격매1화2(ERK1/2)적린산화수평,연구m-Nis대ERK1/2/MAPK신호통로적영향.결과 불동농도m-Nis명현억제료5-HT유도적대서PASMCs증식(P<0.05혹P<0.01)화천이(P<0.01),병정현일정적농도의뢰성;령외,Western blot결과 현시m-Nis대5-HT유도적대서PASMCs중PCNA적단백표체유불동정도적억제작용(P<0.05혹P<0.01),10~(-5),10~(-6),10~(-7) mol·L~(-1) m-Nis환명현억제료5-HT유도적대서PASMCs중ERK1/2린산화수평적승고,p-ERK1/2/ERK1/2비치균유불동정도지강저(P<0.05혹P<0.01).결론 m-Nis대5-HT유도적대서PASMCs증식화천이유명현적억제작용,가능여기억제PCNA단백표체급ERK1/2/MAPK신호통로유관.
Aim To explore the effect of m-Nisoldipine(m-Nis) on 5-HT-induced proliferation,migration of rat PASMCs and to study the mechanisms.Methods PASMCs were cultured with the explant technique,and were divided into 6 groups:control group,5-HT(1 μmol·L~(-1)) group and m-Nis(10~(-5),10~(-6),10~(-7),10~(-8) mol·L~(-1))group.MTT assay was used to evaluate the proliferation of PASMCs,and transwell chambers were used to detect the migration of PASMCs.In addition,the expression of PCNA and the phosphorylation of ERK1/2 were evaluated by Western blot analysis.Results m-Nis inhibited the proliferation(P<0.05 or P<0.01)and migration(P<0.01)of rat PASMCs induced by 5-HT obviously.Similarly,Western blot analysis of PCNA indicated that the expression of PCNA was significantly higher in 5-HT group than that in control group(P<0.01).Whereas,in four m-Nis treated groups,the level of PCNA was markedly decreased(P<0.05 or P<0.01).Meanwhile,m-Nis 10~(-5),10~(-6) and 10~(-7) mol·L~(-1) pretreatment also reduced 5-HT-induced phosphorylation of ERK1/2 obviously(P<0.05 or P<0.01).Conclusion m-Nis inhibits 5-HT-induced proliferation and migration of rat PASMCs obviously,which may be related to the inhibition of PCNA expression and the blockage of ERK1/2/MAPK signal pathway.
