南华大学学报(医学版)
南華大學學報(醫學版)
남화대학학보(의학판)
JOURNAL OF NANHUA UNIVERSITY MEDICAL EDITION
2010年
3期
345-349
,共5页
龙超众%贺大璞%王元星%韦兵%冯耀光
龍超衆%賀大璞%王元星%韋兵%馮耀光
룡초음%하대박%왕원성%위병%풍요광
Eca109%RUNX3基因%5-氮杂胞苷%去甲基化
Eca109%RUNX3基因%5-氮雜胞苷%去甲基化
Eca109%RUNX3기인%5-담잡포감%거갑기화
目的 探讨去甲基化制剂5-氮杂胞苷(5-azaC)干预对Eca109细胞增殖及其抑癌基因RUNX3表达的影响.方法 应用MTT法来观察5-azaC对Eca109细胞增殖的抑制能力;采用10 μmol/L、20 μmol/L和50 μmol/L 3种不同浓度的5-azaC处理Eca109细胞株,采用MSP检测干预前后RUNX3基因启动子区的甲基化状况;应用RT-PCR、Western blotting检测干预前后RUNX3基因的mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 Eca109细胞RUNX3基因启动子区处于异常的高甲基化状态,经5-azaC处理后,高甲基化的RUNX3基因启动子部分去甲基化;处理前启动子高甲基化的RUNX3基因其mRNA或蛋白均不表达,去甲基化处理后能重新激活该基因表达,经3种不同浓度5-azaC处理后,Eca109细胞生长减慢.结论 启动子区高甲基化是食管癌Eca-109细胞RUNX3基因失活的主要原因之一, 5-azaC能逆转RUNX3基因甲基化状态, 从而调控RUNX3基因表达并抑制细胞生长.
目的 探討去甲基化製劑5-氮雜胞苷(5-azaC)榦預對Eca109細胞增殖及其抑癌基因RUNX3錶達的影響.方法 應用MTT法來觀察5-azaC對Eca109細胞增殖的抑製能力;採用10 μmol/L、20 μmol/L和50 μmol/L 3種不同濃度的5-azaC處理Eca109細胞株,採用MSP檢測榦預前後RUNX3基因啟動子區的甲基化狀況;應用RT-PCR、Western blotting檢測榦預前後RUNX3基因的mRNA和蛋白錶達水平的變化.結果 Eca109細胞RUNX3基因啟動子區處于異常的高甲基化狀態,經5-azaC處理後,高甲基化的RUNX3基因啟動子部分去甲基化;處理前啟動子高甲基化的RUNX3基因其mRNA或蛋白均不錶達,去甲基化處理後能重新激活該基因錶達,經3種不同濃度5-azaC處理後,Eca109細胞生長減慢.結論 啟動子區高甲基化是食管癌Eca-109細胞RUNX3基因失活的主要原因之一, 5-azaC能逆轉RUNX3基因甲基化狀態, 從而調控RUNX3基因錶達併抑製細胞生長.
목적 탐토거갑기화제제5-담잡포감(5-azaC)간예대Eca109세포증식급기억암기인RUNX3표체적영향.방법 응용MTT법래관찰5-azaC대Eca109세포증식적억제능력;채용10 μmol/L、20 μmol/L화50 μmol/L 3충불동농도적5-azaC처리Eca109세포주,채용MSP검측간예전후RUNX3기인계동자구적갑기화상황;응용RT-PCR、Western blotting검측간예전후RUNX3기인적mRNA화단백표체수평적변화.결과 Eca109세포RUNX3기인계동자구처우이상적고갑기화상태,경5-azaC처리후,고갑기화적RUNX3기인계동자부분거갑기화;처리전계동자고갑기화적RUNX3기인기mRNA혹단백균불표체,거갑기화처리후능중신격활해기인표체,경3충불동농도5-azaC처리후,Eca109세포생장감만.결론 계동자구고갑기화시식관암Eca-109세포RUNX3기인실활적주요원인지일, 5-azaC능역전RUNX3기인갑기화상태, 종이조공RUNX3기인표체병억제세포생장.
