药学服务与研究
藥學服務與研究
약학복무여연구
PHARMACEUTICAL CARE AND RESEARCH
2010年
4期
275-278
,共4页
曾凡新%董志%傅洁民%刘晓海
曾凡新%董誌%傅潔民%劉曉海
증범신%동지%부길민%류효해
β3肾上腺素受体%激动剂%筛选模型%荧光素酶%报告基因
β3腎上腺素受體%激動劑%篩選模型%熒光素酶%報告基因
β3신상선소수체%격동제%사선모형%형광소매%보고기인
目的:建立基于双荧光素酶报告基因检测的β3肾上腺素受体(β3-AR)激动剂筛选模型,并用于β3-AR激动剂的筛选.方法:应用免疫细胞化学法鉴定β3-AR在β3-CHO细胞上的稳定表达,并将pCRE-luc质粒与pRL-TK质粒共同瞬时转染β3-CHO细胞,建立一种基于双荧光素酶报告基因检测的β3-AR激动剂筛选模型.通过检测报告基因萤火虫荧光素酶与海肾荧光素酶活性的比值,来间接反映配体对β3-AR的激动活性.并以β-AR激动剂异丙肾上腺素刺激对模型的有效性进行验证,在此基础上以此模型对20种新化合物的β3-AR激动活性进行筛选.结果:β3-CHO细胞经免疫细胞化学法鉴定有特异性受体蛋白表达.通过将两个报告基因质粒转染该细胞后,与加入溶剂对照相比,加入异丙肾上腺素可显著促进荧光素酶报告基因的表达,表明该模型有效、可靠.以此模型从20个化合物中初筛出8个活性较强的β3-AR激动剂.结论:本研究建立了基于双荧光素酶报告基因检测的β3-AR激动剂筛选模型,并以此模型筛选发现了几个活性较强的β3-AR激动剂.
目的:建立基于雙熒光素酶報告基因檢測的β3腎上腺素受體(β3-AR)激動劑篩選模型,併用于β3-AR激動劑的篩選.方法:應用免疫細胞化學法鑒定β3-AR在β3-CHO細胞上的穩定錶達,併將pCRE-luc質粒與pRL-TK質粒共同瞬時轉染β3-CHO細胞,建立一種基于雙熒光素酶報告基因檢測的β3-AR激動劑篩選模型.通過檢測報告基因螢火蟲熒光素酶與海腎熒光素酶活性的比值,來間接反映配體對β3-AR的激動活性.併以β-AR激動劑異丙腎上腺素刺激對模型的有效性進行驗證,在此基礎上以此模型對20種新化閤物的β3-AR激動活性進行篩選.結果:β3-CHO細胞經免疫細胞化學法鑒定有特異性受體蛋白錶達.通過將兩箇報告基因質粒轉染該細胞後,與加入溶劑對照相比,加入異丙腎上腺素可顯著促進熒光素酶報告基因的錶達,錶明該模型有效、可靠.以此模型從20箇化閤物中初篩齣8箇活性較彊的β3-AR激動劑.結論:本研究建立瞭基于雙熒光素酶報告基因檢測的β3-AR激動劑篩選模型,併以此模型篩選髮現瞭幾箇活性較彊的β3-AR激動劑.
목적:건립기우쌍형광소매보고기인검측적β3신상선소수체(β3-AR)격동제사선모형,병용우β3-AR격동제적사선.방법:응용면역세포화학법감정β3-AR재β3-CHO세포상적은정표체,병장pCRE-luc질립여pRL-TK질립공동순시전염β3-CHO세포,건립일충기우쌍형광소매보고기인검측적β3-AR격동제사선모형.통과검측보고기인형화충형광소매여해신형광소매활성적비치,래간접반영배체대β3-AR적격동활성.병이β-AR격동제이병신상선소자격대모형적유효성진행험증,재차기출상이차모형대20충신화합물적β3-AR격동활성진행사선.결과:β3-CHO세포경면역세포화학법감정유특이성수체단백표체.통과장량개보고기인질립전염해세포후,여가입용제대조상비,가입이병신상선소가현저촉진형광소매보고기인적표체,표명해모형유효、가고.이차모형종20개화합물중초사출8개활성교강적β3-AR격동제.결론:본연구건립료기우쌍형광소매보고기인검측적β3-AR격동제사선모형,병이차모형사선발현료궤개활성교강적β3-AR격동제.
