蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2010年
6期
889-896
,共8页
张文平%吕正兵%龙晓辉%聂作明%夏佳音%张耀洲
張文平%呂正兵%龍曉輝%聶作明%夏佳音%張耀洲
장문평%려정병%룡효휘%섭작명%하가음%장요주
家蚕孤雌生殖%差异表达蛋白%二维凝胶电泳%基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱%磷脂酰肌醇蛋白聚糖%基因克隆%生物信息学分析
傢蠶孤雌生殖%差異錶達蛋白%二維凝膠電泳%基質輔助激光解吸電離串聯飛行時間質譜%燐脂酰肌醇蛋白聚糖%基因剋隆%生物信息學分析
가잠고자생식%차이표체단백%이유응효전영%기질보조격광해흡전리천련비행시간질보%린지선기순단백취당%기인극륭%생물신식학분석
应用二维凝胶电泳(2DE)技术分离有性生殖蚕卵与孤雌生殖蚕卵的差异蛋白,通过基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF MS)分析获得大量小肽的序列特征.与已构建的家蚕cDNA文库及蛋白质数据库进行比对,确定一个在家蚕孤雌生殖过程中表达量显著上调的差异蛋白为磷脂酰肌醇蛋白聚糖(phosphatidylinositol glyean,PGL).为了探讨PGL蛋白在家蚕孤雌生殖发生中的作用,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术扩增目的基因5'端片段,获得PGL蛋白基因的全长cDNA,生物信息学分析显示该基因cDNA全长1 038 bp,编码345个氨基酸,其编码蛋白理论分子质量为39.516 kD,等电点为5.845,包含1个保守的GP18结构域,信号肽概率为0.997,可能为分泌型蛋白,预测蛋白功能域包含酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化、N糖基化、蛋白激酶c磷酸化等多个功能位点.依据PGL蛋白的理化性质、结构功能推测其有可能在不同程度上通过细胞信号转导途径参与了家蚕孤雌生殖发生过程并发挥重要作用.
應用二維凝膠電泳(2DE)技術分離有性生殖蠶卵與孤雌生殖蠶卵的差異蛋白,通過基質輔助激光解吸電離串聯飛行時間質譜(MALDI-TOF-TOF MS)分析穫得大量小肽的序列特徵.與已構建的傢蠶cDNA文庫及蛋白質數據庫進行比對,確定一箇在傢蠶孤雌生殖過程中錶達量顯著上調的差異蛋白為燐脂酰肌醇蛋白聚糖(phosphatidylinositol glyean,PGL).為瞭探討PGL蛋白在傢蠶孤雌生殖髮生中的作用,採用cDNA末耑快速擴增(RACE)技術擴增目的基因5'耑片段,穫得PGL蛋白基因的全長cDNA,生物信息學分析顯示該基因cDNA全長1 038 bp,編碼345箇氨基痠,其編碼蛋白理論分子質量為39.516 kD,等電點為5.845,包含1箇保守的GP18結構域,信號肽概率為0.997,可能為分泌型蛋白,預測蛋白功能域包含酪蛋白激酶Ⅱ燐痠化、N糖基化、蛋白激酶c燐痠化等多箇功能位點.依據PGL蛋白的理化性質、結構功能推測其有可能在不同程度上通過細胞信號轉導途徑參與瞭傢蠶孤雌生殖髮生過程併髮揮重要作用.
응용이유응효전영(2DE)기술분리유성생식잠란여고자생식잠란적차이단백,통과기질보조격광해흡전리천련비행시간질보(MALDI-TOF-TOF MS)분석획득대량소태적서렬특정.여이구건적가잠cDNA문고급단백질수거고진행비대,학정일개재가잠고자생식과정중표체량현저상조적차이단백위린지선기순단백취당(phosphatidylinositol glyean,PGL).위료탐토PGL단백재가잠고자생식발생중적작용,채용cDNA말단쾌속확증(RACE)기술확증목적기인5'단편단,획득PGL단백기인적전장cDNA,생물신식학분석현시해기인cDNA전장1 038 bp,편마345개안기산,기편마단백이론분자질량위39.516 kD,등전점위5.845,포함1개보수적GP18결구역,신호태개솔위0.997,가능위분비형단백,예측단백공능역포함락단백격매Ⅱ린산화、N당기화、단백격매c린산화등다개공능위점.의거PGL단백적이화성질、결구공능추측기유가능재불동정도상통과세포신호전도도경삼여료가잠고자생식발생과정병발휘중요작용.
