CAJ | 학술논문

目的:利用我们已经成功沉默前列腺特异性膜抗原(PSMA)的LNCaP前列腺癌细胞株,探讨PSMA对LNCaP细胞磷酸化胞外信号调节激酶(ERK)及细胞生长、迁移的影响,为进一步研究PSMA在前列腺癌发展中的作用提供理论基础.方法:实验对象包括携带可稳定抑制PSMA表达siRNA慢病毒的LNCaP细胞组(实验组),携带对任何基因无干扰作用siRNA慢病毒的LNCaP细胞组(空转组),同时建立未进行处理的普通LNCaP细胞组(对照组),分别对在一般培养基及添加ERK蛋白上游抑制剂的3组细胞,使用Western blotting和细胞免疫化学的方法检测MAPK/ERK蛋白活性,并用MTT描绘细胞生长曲线、Transwell观察细胞迁移情况.结果:在一般培养基的3组细胞中,Western blotting提示实验组磷酸化ERK蛋白表达明显低于对照组和空转组;免疫细胞化学结果显示实验组染色明显比对照组和空转组弱,阳性细胞数较少;MTT绘制生长曲线,得到实验组细胞的增殖生长能力较对照组、空转组降低;Transwell结果提示实验组较对照组和空转组细胞的增殖迁移能力降低.在ERK磷酸化被抑制的情况下,3组细胞磷酸化ERK蛋白均低表达,MTT及Transwell检测显示其生长迁移能力都处于低水平,且与在一般培养基中实验组的效应类似.结论:初步发现PSMA可能通过上调前列腺癌LNCaP细胞ERK蛋白的活性,从而在其生长、迁移中起正向调节作用.
목적:이용아문이경성공침묵전렬선특이성막항원(PSMA)적LNCaP전렬선암세포주,탐토PSMA대LNCaP세포린산화포외신호조절격매(ERK)급세포생장、천이적영향,위진일보연구PSMA재전렬선암발전중적작용제공이론기출.방법:실험대상포괄휴대가은정억제PSMA표체siRNA만병독적LNCaP세포조(실험조),휴대대임하기인무간우작용siRNA만병독적LNCaP세포조(공전조),동시건립미진행처리적보통LNCaP세포조(대조조),분별대재일반배양기급첨가ERK단백상유억제제적3조세포,사용Western blotting화세포면역화학적방법검측MAPK/ERK단백활성,병용MTT묘회세포생장곡선、Transwell관찰세포천이정황.결과:재일반배양기적3조세포중,Western blotting제시실험조린산화ERK단백표체명현저우대조조화공전조;면역세포화학결과현시실험조염색명현비대조조화공전조약,양성세포수교소;MTT회제생장곡선,득도실험조세포적증식생장능력교대조조、공전조강저;Transwell결과제시실험조교대조조화공전조세포적증식천이능력강저.재ERK린산화피억제적정황하,3조세포린산화ERK단백균저표체,MTT급Transwell검측현시기생장천이능력도처우저수평,차여재일반배양기중실험조적효응유사.결론:초보발현PSMA가능통과상조전렬선암LNCaP세포ERK단백적활성,종이재기생장、천이중기정향조절작용.