疑难病杂志
疑難病雜誌
의난병잡지
JOURNAL OF DIFFICULT AND COMPLICATED CASES
2011年
7期
517-521
,共5页
李春海%桑翠玲%宋树英%周万先%尹俊%李文慧
李春海%桑翠玲%宋樹英%週萬先%尹俊%李文慧
리춘해%상취령%송수영%주만선%윤준%리문혜
组织因子%反义寡脱氧核苷酸%心肌%缺血再灌注%活性氧簇%蛋白酶激活受体-1%p38 有丝分裂原激活蛋白激酶%大鼠
組織因子%反義寡脫氧覈苷痠%心肌%缺血再灌註%活性氧簇%蛋白酶激活受體-1%p38 有絲分裂原激活蛋白激酶%大鼠
조직인자%반의과탈양핵감산%심기%결혈재관주%활성양족%단백매격활수체-1%p38 유사분렬원격활단백격매%대서
目的 研究聚酰胺-胺型树枝状高聚物(PAMAM-D)纳米载体介导组织因子(TF)反义寡脱氧核苷酸防治大鼠心肌缺血再灌注损伤的分子机制.方法 分别设计合成针对大鼠TF的反义寡脱氧核苷酸(AS/TF)、正义寡脱氧核苷酸(S/TF)和错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF),分别耦联于PAMAM-D纳米载体,构建ODN-PAMAM-D的聚合物.将100只雄性Lewis大鼠随机等分为假手术组、缺血再灌注组、AS/TF防治组、S/TF对照组和Sc/TF对照组.除假手术组和缺血再灌注组大鼠静脉分别注入生理盐水和PAMAM-D外,其余3组大鼠分别注入与PAMAM-D相耦联的相应寡核苷酸.各组大鼠于注射后10 h开胸暴露心脏,除假手术组以外的其他4组大鼠于冠状动脉左前降支中1/2处结扎造成心肌缺血.心肌缺血90 min后,解除结扎,再灌注3 h.假手术组的大鼠于冠状动脉左前降支中1/2处只穿线,不结扎,持续4 h 30 min.分别于缺血90 min和再灌注结束后取各组大鼠的血液检测肌钙蛋白T(TnT)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量.并于实验结束后取梗死区及边缘区心肌组织检测TF基因的转录、TF的促凝活性(TF∶C)和TF的抗原含量(TF∶Ag)以及活性氧簇(ROS)、蛋白酶激活受体-1(PAR-1)和p38 有丝分裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)的表达.结果 心肌缺血90 min及再灌注3 h后,缺血再灌注组大鼠血液中的TnT和LDH含量均显著高于假手术组,而AS/TF防治组均明显低于其他3个缺血再灌注组(P<0.05);梗死区及边缘区心肌组织中TF基因的转录和表达均强于假手术组,AS/TF防治组则较其他3个缺血再灌注组明显减弱(P<0.01).流式细胞学检测显示,心肌缺血再灌注3 h后,各缺血再灌注组大鼠心肌组织中ROS、PAR-1和p38 MAPK的表达均显著增多,AS/TF防治组则明显低于缺血再灌注组、S/TF对照组和Sc/TF对照组(P<0.05).结论 TF不仅介导了凝血过程,而且通过激活PAR-1和p38 MAPK诱发了炎性反应,从而加重了心肌组织损伤.TF是心肌缺血再灌注损伤的"中心分子",针对TF的反义寡脱氧核苷酸耦联G10代PAMAM-D纳米载体不仅抑制了TF的转录和表达,而且减轻了心肌缺血再灌注损伤.
目的 研究聚酰胺-胺型樹枝狀高聚物(PAMAM-D)納米載體介導組織因子(TF)反義寡脫氧覈苷痠防治大鼠心肌缺血再灌註損傷的分子機製.方法 分彆設計閤成針對大鼠TF的反義寡脫氧覈苷痠(AS/TF)、正義寡脫氧覈苷痠(S/TF)和錯配寡脫氧覈苷痠(Sc/TF),分彆耦聯于PAMAM-D納米載體,構建ODN-PAMAM-D的聚閤物.將100隻雄性Lewis大鼠隨機等分為假手術組、缺血再灌註組、AS/TF防治組、S/TF對照組和Sc/TF對照組.除假手術組和缺血再灌註組大鼠靜脈分彆註入生理鹽水和PAMAM-D外,其餘3組大鼠分彆註入與PAMAM-D相耦聯的相應寡覈苷痠.各組大鼠于註射後10 h開胸暴露心髒,除假手術組以外的其他4組大鼠于冠狀動脈左前降支中1/2處結扎造成心肌缺血.心肌缺血90 min後,解除結扎,再灌註3 h.假手術組的大鼠于冠狀動脈左前降支中1/2處隻穿線,不結扎,持續4 h 30 min.分彆于缺血90 min和再灌註結束後取各組大鼠的血液檢測肌鈣蛋白T(TnT)和乳痠脫氫酶(LDH)的含量.併于實驗結束後取梗死區及邊緣區心肌組織檢測TF基因的轉錄、TF的促凝活性(TF∶C)和TF的抗原含量(TF∶Ag)以及活性氧簇(ROS)、蛋白酶激活受體-1(PAR-1)和p38 有絲分裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)的錶達.結果 心肌缺血90 min及再灌註3 h後,缺血再灌註組大鼠血液中的TnT和LDH含量均顯著高于假手術組,而AS/TF防治組均明顯低于其他3箇缺血再灌註組(P<0.05);梗死區及邊緣區心肌組織中TF基因的轉錄和錶達均彊于假手術組,AS/TF防治組則較其他3箇缺血再灌註組明顯減弱(P<0.01).流式細胞學檢測顯示,心肌缺血再灌註3 h後,各缺血再灌註組大鼠心肌組織中ROS、PAR-1和p38 MAPK的錶達均顯著增多,AS/TF防治組則明顯低于缺血再灌註組、S/TF對照組和Sc/TF對照組(P<0.05).結論 TF不僅介導瞭凝血過程,而且通過激活PAR-1和p38 MAPK誘髮瞭炎性反應,從而加重瞭心肌組織損傷.TF是心肌缺血再灌註損傷的"中心分子",針對TF的反義寡脫氧覈苷痠耦聯G10代PAMAM-D納米載體不僅抑製瞭TF的轉錄和錶達,而且減輕瞭心肌缺血再灌註損傷.
목적 연구취선알-알형수지상고취물(PAMAM-D)납미재체개도조직인자(TF)반의과탈양핵감산방치대서심기결혈재관주손상적분자궤제.방법 분별설계합성침대대서TF적반의과탈양핵감산(AS/TF)、정의과탈양핵감산(S/TF)화착배과탈양핵감산(Sc/TF),분별우련우PAMAM-D납미재체,구건ODN-PAMAM-D적취합물.장100지웅성Lewis대서수궤등분위가수술조、결혈재관주조、AS/TF방치조、S/TF대조조화Sc/TF대조조.제가수술조화결혈재관주조대서정맥분별주입생리염수화PAMAM-D외,기여3조대서분별주입여PAMAM-D상우련적상응과핵감산.각조대서우주사후10 h개흉폭로심장,제가수술조이외적기타4조대서우관상동맥좌전강지중1/2처결찰조성심기결혈.심기결혈90 min후,해제결찰,재관주3 h.가수술조적대서우관상동맥좌전강지중1/2처지천선,불결찰,지속4 h 30 min.분별우결혈90 min화재관주결속후취각조대서적혈액검측기개단백T(TnT)화유산탈경매(LDH)적함량.병우실험결속후취경사구급변연구심기조직검측TF기인적전록、TF적촉응활성(TF∶C)화TF적항원함량(TF∶Ag)이급활성양족(ROS)、단백매격활수체-1(PAR-1)화p38 유사분렬원격활단백격매(p38 MAPK)적표체.결과 심기결혈90 min급재관주3 h후,결혈재관주조대서혈액중적TnT화LDH함량균현저고우가수술조,이AS/TF방치조균명현저우기타3개결혈재관주조(P<0.05);경사구급변연구심기조직중TF기인적전록화표체균강우가수술조,AS/TF방치조칙교기타3개결혈재관주조명현감약(P<0.01).류식세포학검측현시,심기결혈재관주3 h후,각결혈재관주조대서심기조직중ROS、PAR-1화p38 MAPK적표체균현저증다,AS/TF방치조칙명현저우결혈재관주조、S/TF대조조화Sc/TF대조조(P<0.05).결론 TF불부개도료응혈과정,이차통과격활PAR-1화p38 MAPK유발료염성반응,종이가중료심기조직손상.TF시심기결혈재관주손상적"중심분자",침대TF적반의과탈양핵감산우련G10대PAMAM-D납미재체불부억제료TF적전록화표체,이차감경료심기결혈재관주손상.
