CAJ | 학술논문

目的探讨逆转录病毒介导内皮抑素基因转移的方法及其表达产物人内皮抑素对人血管内皮细胞的作用.方法以逆转录病毒为载体,转导内皮抑素基因至肺腺癌A549细胞,获得含内皮抑素基因的A549/Endo细胞. PCR方法检验外源性内皮抑素基因在宿主细胞中的整合.培养A549/Endo细胞,收集上清液.ELISA法检测上清液中内皮抑素的浓度,四唑盐比色试验(MTT)、流式细胞术(FCM)、原位细胞凋亡(TUNEL)观察该上清液对血管内皮细胞EA.hy926的抑制作用.结果 PCR法证实A549/Endo细胞基因组中整合有外源性内皮抑素基因.A549/Endo细胞(1×105/ml)培养48h后,上清液中内皮抑素含量为(348±120) pg/ml,MTT法显示含内皮抑素的上清液能明显抑制 EA.hy926细胞的生长.FCM、TUNEL法显示内皮抑素可诱导EA.hy926凋亡.结论逆转录病毒能高效介导内皮抑素基因转移,内皮抑素基因表达产物能明显抑制人血管内皮细胞的生长,诱导其凋亡.
목적탐토역전록병독개도내피억소기인전이적방법급기표체산물인내피억소대인혈관내피세포적작용.방법이역전록병독위재체,전도내피억소기인지폐선암A549세포,획득함내피억소기인적A549/Endo세포. PCR방법검험외원성내피억소기인재숙주세포중적정합.배양A549/Endo세포,수집상청액.ELISA법검측상청액중내피억소적농도,사서염비색시험(MTT)、류식세포술(FCM)、원위세포조망(TUNEL)관찰해상청액대혈관내피세포EA.hy926적억제작용.결과 PCR법증실A549/Endo세포기인조중정합유외원성내피억소기인.A549/Endo세포(1×105/ml)배양48h후,상청액중내피억소함량위(348±120) pg/ml,MTT법현시함내피억소적상청액능명현억제 EA.hy926세포적생장.FCM、TUNEL법현시내피억소가유도EA.hy926조망.결론역전록병독능고효개도내피억소기인전이,내피억소기인표체산물능명현억제인혈관내피세포적생장,유도기조망.