兰州大学学报（自然科学版）
蘭州大學學報（自然科學版）
란주대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF LANZHOU UNIVERSITY（NATURAL SCIENCES）
2008年
2期
41-46,52
,共7页
康国章%张孟琴%官春云%郭天财%朱云集
康國章%張孟琴%官春雲%郭天財%硃雲集
강국장%장맹금%관춘운%곽천재%주운집
普通小麦%AGPase胞质型小亚基%表达载体
普通小麥%AGPase胞質型小亞基%錶達載體
보통소맥%AGPase포질형소아기%표체재체
采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶AGPase胞质型小亚基(AGPase plastic small subunit,SSU I)的cDNA全长,并构建了此基因的过表达、反义表达和RNAi干扰载体.SSU I的cDNA全长为1465 bp(GenBank No.EF405961),编码域长度为1 422 bp,位于EF405961的2～1423 bp.同源性比较结果表明:与GenBank上已报道的SSU I基因(X66080,AF244997,Z48562)同源性达98%～99%.以pWM101质粒为基础,构建了由35S启动子调控的SSU I基因的过表达载体p.WM101SSU I S;将该基因反向置于pB1121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了SSU I的反义表达载体pBI121SSU I A.同时还克隆出SSU I基因的一段260 bp高保守序列,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGC5941SSU I.
採用RT-PCR方法從小麥品種豫教2號的髮育籽粒中剋隆齣小麥澱粉閤成關鍵酶AGPase胞質型小亞基(AGPase plastic small subunit,SSU I)的cDNA全長,併構建瞭此基因的過錶達、反義錶達和RNAi榦擾載體.SSU I的cDNA全長為1465 bp(GenBank No.EF405961),編碼域長度為1 422 bp,位于EF405961的2～1423 bp.同源性比較結果錶明:與GenBank上已報道的SSU I基因(X66080,AF244997,Z48562)同源性達98%～99%.以pWM101質粒為基礎,構建瞭由35S啟動子調控的SSU I基因的過錶達載體p.WM101SSU I S;將該基因反嚮置于pB1121質粒的CaMV35S啟動子之後,構建瞭SSU I的反義錶達載體pBI121SSU I A.同時還剋隆齣SSU I基因的一段260 bp高保守序列,以pFGC5941質粒為基礎,構建瞭RNAi榦擾載體pFGC5941SSU I.
채용RT-PCR방법종소맥품충예교2호적발육자립중극륭출소맥정분합성관건매AGPase포질형소아기(AGPase plastic small subunit,SSU I)적cDNA전장,병구건료차기인적과표체、반의표체화RNAi간우재체.SSU I적cDNA전장위1465 bp(GenBank No.EF405961),편마역장도위1 422 bp,위우EF405961적2～1423 bp.동원성비교결과표명:여GenBank상이보도적SSU I기인(X66080,AF244997,Z48562)동원성체98%～99%.이pWM101질립위기출,구건료유35S계동자조공적SSU I기인적과표체재체p.WM101SSU I S;장해기인반향치우pB1121질립적CaMV35S계동자지후,구건료SSU I적반의표체재체pBI121SSU I A.동시환극륭출SSU I기인적일단260 bp고보수서렬,이pFGC5941질립위기출,구건료RNAi간우재체pFGC5941SSU I.
