CAJ | 학술논문

背景:研究表明离心力等力学刺激对细胞的功能活动及人体组织器官的正常发育具有重要影响,而且力学刺激也影响骨髓间充质干细胞的分化.目的:观察施加不同稃度离心力对人骨髓问充质干细胞,聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物生物学件状的影响.设计、时间及地点:细胞-组织工程学体外实验,于2008-05/12在解放军南京军区福州总医院实验科及病理科完成.材料:骨髓来源于因骨不连行自体髂骨移植的患者,由解放军南京军区福州总医院骨二科提供.聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物为济南岱罡生物公司产品.方法:自人体髂骨抽取骨髓15 mL,密度梯度离心法体外分离培养骨髓间充质干细胞,传至第3代制成2×1010L-1细胞悬液,均匀接种到聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物上,5 d后加入软骨细胞诱导液.设立4组:3个受力组于离心管内培养,分别施加100g,200g,300g离心力,2次/d,30 min/次.间隔 12 h,受力4周;静止组于6孔板内常规培养.主要观察指标:骨髓间充质干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物的黏附情况,复合物Ⅱ型胶原的表达及蛋白聚糖含量.结果:人骨髓间充质干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物黏附性良好,能在聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物上生长并分泌基质.离心培养4周后,各受力组形成的复合物体积无收缩,且200 g受力组体积最大,弹性较好;静止组复合物体积收缩,弹性也较各受力组差.200 g受力组苏木精-伊红染色后出现大量的软骨陷窝样结构,偶见同源细胞群,Ⅱ型胶原免疫组化染色后可见较多呈黄色的软骨细胞特异性基质Ⅱ型胶原;余3组形成的陷窝样结构及Ⅱ型胶原均较少.与静止组比较,体外培养4周各受力组复合物分泌的蛋白聚糖含量均明显升高(P＜0.05):与200 g受力组比较,100 g,300 g受力组复合物分泌的蛋白聚糖含量均明显降低(P＜0.05):100 g,300 g受力组间比较无明显差异.结论:入骨髓间充质干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物具有良好的黏附性能.在软骨细胞诱导液存在的前提下,加适当的力学刺激更有利于骨髓间充质干细胞向软骨细胞转化,200 g离心力是较佳的力学刺激条件. 揹景:研究錶明離心力等力學刺激對細胞的功能活動及人體組織器官的正常髮育具有重要影響,而且力學刺激也影響骨髓間充質榦細胞的分化.目的:觀察施加不同稃度離心力對人骨髓問充質榦細胞,聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物生物學件狀的影響.設計、時間及地點:細胞-組織工程學體外實驗,于2008-05/12在解放軍南京軍區福州總醫院實驗科及病理科完成.材料:骨髓來源于因骨不連行自體髂骨移植的患者,由解放軍南京軍區福州總醫院骨二科提供.聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物為濟南岱罡生物公司產品.方法:自人體髂骨抽取骨髓15 mL,密度梯度離心法體外分離培養骨髓間充質榦細胞,傳至第3代製成2×1010L-1細胞懸液,均勻接種到聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物上,5 d後加入軟骨細胞誘導液.設立4組:3箇受力組于離心管內培養,分彆施加100g,200g,300g離心力,2次/d,30 min/次.間隔 12 h,受力4週;靜止組于6孔闆內常規培養.主要觀察指標:骨髓間充質榦細胞與聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物的黏附情況,複閤物Ⅱ型膠原的錶達及蛋白聚糖含量.結果:人骨髓間充質榦細胞與聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物黏附性良好,能在聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物上生長併分泌基質.離心培養4週後,各受力組形成的複閤物體積無收縮,且200 g受力組體積最大,彈性較好;靜止組複閤物體積收縮,彈性也較各受力組差.200 g受力組囌木精-伊紅染色後齣現大量的軟骨陷窩樣結構,偶見同源細胞群,Ⅱ型膠原免疫組化染色後可見較多呈黃色的軟骨細胞特異性基質Ⅱ型膠原;餘3組形成的陷窩樣結構及Ⅱ型膠原均較少.與靜止組比較,體外培養4週各受力組複閤物分泌的蛋白聚糖含量均明顯升高(P＜0.05):與200 g受力組比較,100 g,300 g受力組複閤物分泌的蛋白聚糖含量均明顯降低(P＜0.05):100 g,300 g受力組間比較無明顯差異.結論:入骨髓間充質榦細胞與聚乳痠-聚羥基乙痠共聚物具有良好的黏附性能.在軟骨細胞誘導液存在的前提下,加適噹的力學刺激更有利于骨髓間充質榦細胞嚮軟骨細胞轉化,200 g離心力是較佳的力學刺激條件.
배경:연구표명리심력등역학자격대세포적공능활동급인체조직기관적정상발육구유중요영향,이차역학자격야영향골수간충질간세포적분화.목적:관찰시가불동부도리심력대인골수문충질간세포,취유산-취간기을산공취물생물학건상적영향.설계、시간급지점:세포-조직공정학체외실험,우2008-05/12재해방군남경군구복주총의원실험과급병이과완성.재료:골수래원우인골불련행자체가골이식적환자,유해방군남경군구복주총의원골이과제공.취유산-취간기을산공취물위제남대강생물공사산품.방법:자인체가골추취골수15 mL,밀도제도리심법체외분리배양골수간충질간세포,전지제3대제성2×1010L-1세포현액,균균접충도취유산-취간기을산공취물상,5 d후가입연골세포유도액.설립4조:3개수력조우리심관내배양,분별시가100g,200g,300g리심력,2차/d,30 min/차.간격 12 h,수력4주;정지조우6공판내상규배양.주요관찰지표:골수간충질간세포여취유산-취간기을산공취물적점부정황,복합물Ⅱ형효원적표체급단백취당함량.결과:인골수간충질간세포여취유산-취간기을산공취물점부성량호,능재취유산-취간기을산공취물상생장병분비기질.리심배양4주후,각수력조형성적복합물체적무수축,차200 g수력조체적최대,탄성교호;정지조복합물체적수축,탄성야교각수력조차.200 g수력조소목정-이홍염색후출현대량적연골함와양결구,우견동원세포군,Ⅱ형효원면역조화염색후가견교다정황색적연골세포특이성기질Ⅱ형효원;여3조형성적함와양결구급Ⅱ형효원균교소.여정지조비교,체외배양4주각수력조복합물분비적단백취당함량균명현승고(P＜0.05):여200 g수력조비교,100 g,300 g수력조복합물분비적단백취당함량균명현강저(P＜0.05):100 g,300 g수력조간비교무명현차이.결론:입골수간충질간세포여취유산-취간기을산공취물구유량호적점부성능.재연골세포유도액존재적전제하,가괄당적역학자격경유리우골수간충질간세포향연골세포전화,200 g리심력시교가적역학자격조건.