重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2009年
18期
2306-2307
,共2页
李军%余松涛%司维柯%李招权%潘静%赵宸%赵辰
李軍%餘鬆濤%司維柯%李招權%潘靜%趙宸%趙辰
리군%여송도%사유가%리초권%반정%조신%조신
hTERT%启动子%慢病毒载体
hTERT%啟動子%慢病毒載體
hTERT%계동자%만병독재체
目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子驱动eGFP报告基因的慢病毒载体,观察eGFP在肿瘤细胞中的表达情况.方法 用hTERT基因启动子取代慢病毒载体eGFP上游的CMV启动子;将重组慢病毒载体pLenti-phTERT-eGFP用脂质体介导法转入端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ、SGC7901细胞及端粒酶阴性的U2OS细胞中进行功能鉴定,以慢病毒载体pLenti-pCMV-eGFP作为对照,倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况.结果 在端粒酶阳性的3株细胞中均可以观测到绿色荧光蛋白表达;在端粒酶阴性的U2OS细胞中无绿色荧光蛋白表达.结论 hTERT基因启动子在端粒酶表达阳性的细胞中具有较强转录活性;所构建的慢病毒载体为进一步研究、利用hTERT基因启动子提供了较好的实验工具.
目的 構建人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)基因啟動子驅動eGFP報告基因的慢病毒載體,觀察eGFP在腫瘤細胞中的錶達情況.方法 用hTERT基因啟動子取代慢病毒載體eGFP上遊的CMV啟動子;將重組慢病毒載體pLenti-phTERT-eGFP用脂質體介導法轉入耑粒酶暘性的293FT、HepGⅡ、SGC7901細胞及耑粒酶陰性的U2OS細胞中進行功能鑒定,以慢病毒載體pLenti-pCMV-eGFP作為對照,倒置熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的錶達情況.結果 在耑粒酶暘性的3株細胞中均可以觀測到綠色熒光蛋白錶達;在耑粒酶陰性的U2OS細胞中無綠色熒光蛋白錶達.結論 hTERT基因啟動子在耑粒酶錶達暘性的細胞中具有較彊轉錄活性;所構建的慢病毒載體為進一步研究、利用hTERT基因啟動子提供瞭較好的實驗工具.
목적 구건인단립매역전록매(hTERT)기인계동자구동eGFP보고기인적만병독재체,관찰eGFP재종류세포중적표체정황.방법 용hTERT기인계동자취대만병독재체eGFP상유적CMV계동자;장중조만병독재체pLenti-phTERT-eGFP용지질체개도법전입단립매양성적293FT、HepGⅡ、SGC7901세포급단립매음성적U2OS세포중진행공능감정,이만병독재체pLenti-pCMV-eGFP작위대조,도치형광현미경관찰록색형광단백적표체정황.결과 재단립매양성적3주세포중균가이관측도록색형광단백표체;재단립매음성적U2OS세포중무록색형광단백표체.결론 hTERT기인계동자재단립매표체양성적세포중구유교강전록활성;소구건적만병독재체위진일보연구、이용hTERT기인계동자제공료교호적실험공구.
