首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2011年
6期
798-801
,共4页
李爽%李尧华%叶懿文%李昕%于顺%杨慧%陈彪
李爽%李堯華%葉懿文%李昕%于順%楊慧%陳彪
리상%리요화%협의문%리흔%우순%양혜%진표
含L(DLR类)A重复分拣蛋白相关受体%基因重组蛋白%阿尔茨海默病
含L(DLR類)A重複分揀蛋白相關受體%基因重組蛋白%阿爾茨海默病
함L(DLR류)A중복분간단백상관수체%기인중조단백%아이자해묵병
目的 制备基因重组型人SORL1蛋白质片段,为探讨阿尔茨海默病的发病机制提供实验基础.方法 采用PCR方法扩增人sorl1 cDNA编码区5 923 ～6 260 bp片段,克隆入原核表达载体pET-28a(+)中.用大肠杆菌BL21( DE3) plysS表达重组质粒,用液相色谱法纯化基因重组蛋白.结果 PCR扩增产物为358 bp,其ATG和TGA之间的结构与人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp区完全一致.基因重组质粒在大肠杆菌BL21( DE3) plysS中高效表达,其表达产物存在于包涵体组分中.纯化的基因重组蛋白在SDS-PAGE中表现为单一条带,表观分子量约为13 000.结论 人sorl1 cDNA的5 923 ～6 260 bp片段在原核细胞中大量表达,纯化后的基因重组蛋白可尝试用于抗体的制备.
目的 製備基因重組型人SORL1蛋白質片段,為探討阿爾茨海默病的髮病機製提供實驗基礎.方法 採用PCR方法擴增人sorl1 cDNA編碼區5 923 ～6 260 bp片段,剋隆入原覈錶達載體pET-28a(+)中.用大腸桿菌BL21( DE3) plysS錶達重組質粒,用液相色譜法純化基因重組蛋白.結果 PCR擴增產物為358 bp,其ATG和TGA之間的結構與人sorl1 cDNA的5 923～6 260 bp區完全一緻.基因重組質粒在大腸桿菌BL21( DE3) plysS中高效錶達,其錶達產物存在于包涵體組分中.純化的基因重組蛋白在SDS-PAGE中錶現為單一條帶,錶觀分子量約為13 000.結論 人sorl1 cDNA的5 923 ～6 260 bp片段在原覈細胞中大量錶達,純化後的基因重組蛋白可嘗試用于抗體的製備.
목적 제비기인중조형인SORL1단백질편단,위탐토아이자해묵병적발병궤제제공실험기출.방법 채용PCR방법확증인sorl1 cDNA편마구5 923 ～6 260 bp편단,극륭입원핵표체재체pET-28a(+)중.용대장간균BL21( DE3) plysS표체중조질립,용액상색보법순화기인중조단백.결과 PCR확증산물위358 bp,기ATG화TGA지간적결구여인sorl1 cDNA적5 923～6 260 bp구완전일치.기인중조질립재대장간균BL21( DE3) plysS중고효표체,기표체산물존재우포함체조분중.순화적기인중조단백재SDS-PAGE중표현위단일조대,표관분자량약위13 000.결론 인sorl1 cDNA적5 923 ～6 260 bp편단재원핵세포중대량표체,순화후적기인중조단백가상시용우항체적제비.
